人源趋化因子受体CCR4蛋白表达与纯化研究.pdf

摘要 摘 要 趋化因子受体在人体发育、体内平衡、免疫监视、炎症、等生理过程中发挥 着重要作用。趋化因子受体 CCR4 作为治疗过敏性疾病和实体瘤的重要药物靶 点一直备受关注，但对人源 CCR4 的结构研究尚未见报道。 本课题研究的最终目的是为了解析 CCR4 蛋白未激活状态结构和激活状态 结构。CCR4 结构的解析将阐明小分子药物和 CCR4 靶点结合的分子机制和加深 人们对于趋化因子受体激活机制的理解，为 CCR4 靶点药物的开发提供结构基 础。解析 CCR4 受体的未激活状态和激活状态的结构，前提分别是获得高纯度、 稳定的 CCR4 受体蛋白和 CCR4-CCL22-Gi 复合物蛋白。 本课题使用真核系统昆虫细胞表达人源 CCR4 蛋白，并进行蛋白的提取、纯 化和鉴定。通过对克隆的优化、小分子抑制剂的筛选和实验条件的改进，以获取 CCR4 蛋白。通过对杆状病毒比例的筛选和实验条件的优化，以获取复合物蛋白。 本课题成功将 CCR4 和复合物异源表达在 Sf9