生物化学与分子生物学 .ppt

图16-17 反转录病毒RNA基因组转变为双链cDNA的途径-1 A C D B 反转录酶 反转录酶 反转录酶（RNase H） 生成引物PPT U5-R DNA作为引物 * 第六十三页，共九十二页，2022年，8月28日 图16-17 反转录病毒RNA基因组转变为双链cDNA的途径-2 E H F G 3? * 第六十四页，共九十二页，2022年，8月28日 二 反转录病毒基因组通过cDNA中间体进行复制 cDNA 3? 3? + 3? 3? 5? 5? 5? 5? 3? 3? 5? 5? 5? 5? 初级转录产物 病毒颗粒 进细胞, 脱衣壳 cDNA第一链合成 cDNA第二链合成 整合酶 整合酶 整合 转录 加工 gag-pol mRNA env mRNA 反转录酶 蛋白酶 整合酶 Env蛋白 衣壳蛋白 + (一) (二) (三) (四) 出细胞 病毒装衣壳 病毒组装 细胞基因组 表达 组装 前病毒DNA合成 前病毒DNA * 第六十五页，共九十二页，2022年，8月28日 第四节 DNA损伤与修复 DNA Damage and Repair * 第六十六页，共九十二页，2022年，8月28日 DNA损伤的概念 多种体内外因素所引起的机体细胞DNA分子的组成与结构上的变化。 * 第六十七页，共九十二页，2022年，8月28日 体内 因素 体外 因素 DNA复制错误 化学因素 生物因素 物理因素 DNA自身的不稳定性 机体代谢过程中产生的活性氧 引起DNA损伤的因素 * 第六十八页，共九十二页，2022年，8月28日 C C CH3 C O O O O C C C C N N H C CH3 N H N H R R 胸腺嘧啶二聚体 CH3 N R NO 活性甲基基团 甲基亚硝胺 苯并芘的诱变衍生物 O CH H C HC C H HO OH 紫外线 HNO2 NH2OH (CH3? ) 嘧啶二聚体 形成 碱基交换 C ? U A ? I 碱基 自发丢失 碱基 化学修饰 脱氨基 O 环氧化物 自由基 电离辐射 烷基化合物 重组缺陷导致的DNA片段的缺 陷或插入 H ?、? ?、X 物理因素和化学因素引发的DNA的损伤 * 第六十九页，共九十二页，2022年，8月28日 碱基损伤与糖基破坏 DNA链共价交联 碱基修饰，碱基环破裂 DNA链，链间交联 DNA链与蛋白分子交联 DNA链，链内交联 糖基自由基反应 DNA损伤的类型 DNA链断裂 DNA链单链断裂 DNA链双链断裂 碱基错配 非AT与非CG间的碱基配对 * 第七十页，共九十二页，2022年，8月28日 C A B D E F G H I J K L M N O P Q R 50 aa 大肠杆菌的DNA 聚合酶Ⅰ 18 ? 螺旋, 928 氨基酸 , 分子量102987 道尔顿。 A-F: 323 氨基酸, 小片段, 5? ? 3? DNA外切酶活性。 G-R: 604 氨基酸, Klenow 片段, 3? ? 5? DNA外切酶活性, 5? ? 3? DNA聚合酶活性, 所合成的DNA片段短，20nt。 N C DNA 5?3 exonuclease 5? 3 polymerase 3? 5 exonuclease * 第三十一页，共九十二页，2022年，8月28日 A 5 3 T A A A C A G proof reading 5 3 5 3 5 3 备注：在C与G以及A与T碱基配对原则指导下， DNA pol Ⅲ拥有碱基选择与较读功能(?亚基) 。 DNA聚合酶的碱基选择与较读功能 * 第三十二页，共九十二页，2022年，8月28日 E coli 基因组DNA复制的终止 Tus（反解旋酶, contra helicase），识别结合ter中23bp的共有序列，阻止DnaB的解旋作用，抑制复制叉前行，使复制体解体。 （四）Tus蛋白识别复制终点使复制终止 32, terD/A, terC/B 82, ori C E coli 基因组 K-12 substr. DH10B 4.69 Mb 1：Alu Ⅰ位点，AGCT * 第三十三页，共九十二页，2022年，8月28日 ATCTATTTATTTAGAGA*TCTGTTCTATTGTGA*TCTCTTATTAGGA*TCGCACTGCCCTGTGGATAACAAGGA*TCCGGCTTTTAAGA*TCAACAACCTGGAAAGGA*TCATTAACTGTGAATGA*TCGGTGA*TCCTGGACCGTATAAGCTGGGA*TCAGAATGAGGGGTTATACACAACTCAAAAACTGAACAACAGTTGTTCTTTGGATAACTACCGGTTGA*TC