木犀草素抑制脉络膜黑色素瘤细胞血管生成和血管生成拟态的机制研究.pdfVIP

摘要 摘 要 目的： 体外研究木犀草素对人眼脉络膜黑色素瘤C918细胞血管模式的影响，并初 步探究其相关机制。 方法： HUVEC C918 体外构建三维细胞培养模型： 细胞血管管腔、脉络膜黑色素瘤 细胞血管生成拟态 （vasculogenicmimicry，VM）管腔以及二者共同形成的 “马 赛克”血管管腔。采用CCK-8检测木犀草素对C918细胞和HUVEC 细胞活性 EdU Transwell Transwell 影响。 实验、划痕愈合实验和 细胞迁移实验、 细胞侵袭 实验，分别检测木犀草素对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。采用酶联免疫 吸附实验（ELISA）检测C918细胞和HUVEC 细胞的血管内皮生长因子（VEGF） Westernblot p-PI3K p-Akt 的分泌。采用 法检测 和 蛋白的表达。 结果： CCK-8 结果显示，木犀草素作用于C918细胞和HUVEC 细胞24h 的IC50 24.41μmol/L 27.85μmol/L EdU 值分别为 和 。 细胞增殖实验、划痕愈合实验和 Transwell 细胞迁移实验结果显示，木犀草素可有效抑制C918细胞和HUVEC 细 胞的增殖和迁移，并且呈现出剂量依赖性。Transwell 细胞侵袭实验结果显示木 犀草素可有效抑制C918细胞的侵袭，也表现出剂量依赖性。ELISA 实验显示木 犀草素可有效抑制C918细胞和HUVEC 细胞分泌VEGF。Westernblot 实验结果 显示，木犀草素可降低C918细胞和HUVEC 细胞内p-PI3K、p-Akt 蛋白的表达 量。 结论： 在体外实验中，木犀草素能抑制HUVEC 细胞血管生成，脉络膜黑色素瘤 C918细胞血管生成拟态以及“马赛克”血管的形成。木犀草素能有效抑制C918 细胞的增殖、迁移、侵袭，以及有效抑制HUVEC 细胞的增殖、迁移。木犀草素 抑制了C918细胞和HUVEC 细胞VEGF 的分泌以及减少了p-PI3K 和p-Akt 的 表达水平。 II 目录 目 录 第1章 引言····················································································· 1 1.1 选题背景1 1.2 科学假设2 第2 章 材料和方法············································································3 2.1 实验材料3 2.1.1 研究对象········································································3 2.1.2 实验试剂和耗材·······························································3 2.1.3 实验仪器设备··································································4 2.2 实验方法5 2.2.1 试剂配制····················································