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基因工程学案检测
1.限制性核酸内切酶(也称“限制酶”)
(1)特点:①识别双链DNA分子的某种 序列。②切割特定核苷酸序列中的特定切点。
(2)作用:断裂特定的两个核苷酸之间的 。
(3)结果:产生 。
2.DNA连接酶
E?coli DNA连接酶来源于 、连接 末端;T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,连接两种末端,但连接 末端效率低。
3.基因进入受体细胞的载体
(1)种类有 、λ噬菌体的衍生物和 。
(2)必备条件:在宿主细胞中保存下来并大量 、有多个 、有一定的 ,便于筛选、对受体细胞无害,大小适宜。
4.目的基因的获取方法
①从基因文库中获取目的基因,包括基因组文库和 。
②利用 技术扩增目的基因:
③ 直接人工合成目的基因(根据氨基酸序列合成DNA)
5.基因表达载体的组成为: 、目的基因、终止子、 。
6.限制酶Mun Ⅰ和限制酶EcoR Ⅰ的识别序列及切割位点分别是。如图表示四种质粒和目的基因,其中,质粒上箭头所指部位为酶的识别位点,阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是( )
7.下表所示为几种限制酶的识别序列及其切割位点,请回答下列问题:
(1)从表中四种酶的切割位点看,可以切出平末端的酶是________。
(2)将目的基因与质粒DNA缝合依靠的是________酶,它的作用是形成磷酸二酯键。
(3)图1中的质粒分子可被表中限制酶________切割,切割后的质粒含有________个游离的磷酸基团。
(4)在相关酶的作用下,图1中的甲与图2中的乙________(填“能”或“不能”)拼接起来。请说明理由:____________________________________。
一、知识点填空
1、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤:______________________、___________________、___________________、__________________________。
2、目的基因的获取
目的基因可以从____________________________,也可以用_________________。目的基因主要是指____________________,也可以是一些____________________________。
获取目的基因的方法有以下几种: 、_______________________________、_____________________________________。
3、基因表达载体的构建
基因工程的核心是___________________。一个基因表达载体的组成除了 外,还必须有_____________ 、_____________以及 _____________ 等。
4、将目的基因导入受体细胞
转化:___________________________________________________________。
将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是______________,除此之外,还有________和______________等方法。 ______________是转基因动物中采用最多,也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。大肠杆菌细胞最常用的转化方法是:首先用_______处理细胞,使细胞处于一种___________________________________的生理状态,这种细胞称为 。
5、目的基因的检测与鉴定
要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因,非常关键,检测方法是______________。要检测目的基因是否转录出了mRNA,检测方法是______________。检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是______________。除了上述分子检测外,有的还需要进行________________的鉴定。
习题练习
1、受体细胞不同,将目的基因导入受体细胞的方法也不相同,下列受体细胞与导入方法匹配错误的一项是( )
A.棉花细胞—花粉管通道法
B.大肠杆菌—
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