分子生物学课件第四章.pptVIP

分子生物学课件第四章;● 遗传密码——三联子 ● tRNA的结构、功能与种类 ● 核糖体的结构与功能 ● 蛋白质合成的生物学机制 ● 蛋白质的运转机制;4.4 蛋白质合成的生物学机制;阶段;4.4.1 氨基酸的活化;氨基酸的活化又分为两步：;4.4.2 翻译的起始;翻译起始又可被分成3步：;Shine及Dalgarno等证明几乎所有原核生物mRNA上都有一个5-AGGAGGU-3序列，这个富嘌呤区与30S亚基上16S rRNA3端的富嘧啶区序列5-GAUCACCUCCUUA-3相互补,帮助从起始AUG处开始翻译 。;IF-3;IF-3;IF-3;真核生物翻译起始的特点（与原核生物对比）;真核生物翻译起始复合物形成(区别原核生物);;4.4.3 肽链的延伸;原核延长因子;1、AA-tRNA与核糖体A位点的结合;通过延伸因子EF-Ts再生GTP,形成EF-Tu?GTP复合物 ;第二十页，共七十页，2022年，8月28日;Tu;是由转肽酶/肽基转移酶催化;核糖体向mRNA3端方向移动一个密码子。 需要消耗GTP，并需EF-G延伸因子;fMet;第二十五页，共七十页，2022年，8月28日;真核生物---只有一个终止因子（eRF）;原核肽链合成终止过程 ;;第二十九页，共七十页，2022年，8月28日;4.4.5 蛋白质前体的加工;新生蛋白质在去掉N端一部分残基后变成有功能的蛋白质;2、二硫键的形成; 氨基酸侧链的修饰包括磷酸化(如核糖体蛋白质)、糖基化(如各种糖蛋白)、甲基化(如组蛋白、肌肉蛋白质)、乙基化(如组蛋白)、羟基化(如胶原蛋白)和羧基化等。糖蛋白是通过蛋白质中天冬氨酸、丝氨酸、苏氨酸残基侧链上加上糖基形成的，胶原蛋白上的脯氨酸和赖氨酸为羟基化的。内质网是蛋白质N-糖基化的主要场所。;;Functions of glycosylation;4、切除新生链中非功能片段;第三十七页，共七十页，2022年，8月28日;4.4.6 蛋白质生物合成抑制剂;四环素族; 嘌呤霉素作用示意图;小结;● 遗传密码——三联子 ● tRNA的结构、功能与种类 ● 核糖体的结构与功能 ● 蛋白质合成的生物学机制 ● 蛋白质的运转机制;4.5 蛋白质运转机制;第四十四页，共七十页，2022年，8月28日;蛋白质运转可分为两大类: 1、翻译运转同步机制：蛋白质的合成和运转同时发生 2、翻译后运转机制：蛋白质从核糖体上释放后才发生运转。 ;蛋白性质 ;第四十七页???共七十页，2022年，8月28日;4.5.1 翻译-运转同步机制;（1）一般带有10-15个疏水氨基酸； （2）在靠近该序列N-端常常有1个或数个带正电荷的氨基酸； （3）在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链（丙氨酸或甘氨酸）。;图4－28 蛋白质通过其N端的信号肽在内织网中运转到不同的细胞器;3、信号肽假说内容;第五十二页，共七十页，2022年，8月28日;第五十三页，共七十页，2022年，8月28日;;4.5.2 翻译后运转机制;4.5.2.1 线粒体蛋白质跨膜运转;2）蛋白质通过线粒体内膜的运转是一种需能过程；蛋白质跨膜运转时的能量来自线粒体Hsp70引发的ATP水解和膜电位差。 3）蛋白质通过线粒体膜运转时，首先由外膜上的Tom受体复合蛋白识别与分子伴侣相结合的待运转多肽，通过Tom和Tim组成的膜通道进入线粒体内腔。; 线粒体有内、外两层膜，前导肽的不同部位可能在蛋白质的跨膜运转过程中发挥不同的作用。有些前导肽含有“止运入”肽段，当该肽段被跨膜通道中的受体识别时，所运输的多肽将定位在膜上。;二、前导肽的作用与特点;2、前导肽的特点: 1）带正电荷的碱性氨基酸(特别是精氨酸)含量较为丰富。 2）缺少带负电荷的酸性氨基酸； 3）羟基氨基酸(特别是丝氨酸)含量较高; 4）有形成两亲(既有亲水又有疏水部分)а-螺旋结构的能力。;4.5.2.2 核定位蛋白的运转机制;在多细胞真核生物中，每当细胞发生分裂时，核膜被破坏，等到细胞分裂完成后，核膜被重新建成，分散在细胞内的核蛋白必须被重新运入核内，因此，为了核蛋白的重复定位，这些蛋白质中的信号肽――被称为核定位序列(nuclear localization sequence, NLS)一般都不被切除。NLS可以位于核蛋白的任何部位。;蛋白质向核内运输过程需要核运转因子α、β和一个GTP酶(Ran)。а和β组成的异源二聚体是核定位蛋白的可溶性受体，与核定位序列相结合的是а亚基。由上述3个蛋白组成的复合物停靠在核孔处，依靠Ran GTP酶水解GTP提供的能量进入细胞核，а和β亚基解离，核蛋白与а亚基解离，а和β分别通过核孔复合体回到细胞质中，起始新一轮蛋白