硕士课程-中药指纹图谱.pptVIP

中药指纹图谱－质量评价、质量控制与新药研发 章弘扬 化学与分子工程学院 分析教研组 内容 中药指纹图谱基础理论 中药指纹图谱获取方法学研究 中药指纹图谱特征性研究 中药指纹图谱新方法 中药指纹图谱信息处理 应用：药材、方剂、二次开发与组效学 中药质量智能控制体系 （一）中药指纹图谱基础理论 中药的特点 指纹图谱（fingerprint）技术 将指纹图谱纳入中药研究体系的必要性 使中药从单一成分控制过渡到与中医理论相符的整体控制成为可能。 作为中药整体化学信息的一种表达方式，为从整体上研究中药组分与疗效的相关性（组效学）提供了技术手段 一次完成对处方中多信息的控制，可减少对多项单一指标分别控制方法的人力物力消耗，降低对分离制备大量中药对照品的依赖。 指纹图谱分析技术平台，得到的信息量大，应用价值高, 可推广性强。 中药指纹图谱的定义 中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光（波）谱图。 中药指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂、半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。 指纹图谱－新的中药质控模式 A. 中药指纹图谱的分类 薄层色谱（TLC）指纹图谱 高效液相色谱（HPLC）指纹图谱 气相色谱（GC）指纹图谱 高速逆流色谱（HSCCC）指纹图谱 X射线衍射指纹图谱 核磁共振（NMR）指纹图谱 质谱（MS）指纹图谱 红外光谱（IR）指纹图谱 紫外光谱（UV）指纹图谱 毛细管电泳（CE）指纹图谱 多维指纹图谱（LC/DAD/MS/MS、LC/NMR…） B. 中药指纹图谱的研究内容 中药指纹图谱获取方法学研究 指纹图谱鉴别方法学研究 中药药效组分筛选及检测方法学研究 中药指纹图谱组效学研究 1. 中药材、中药制剂化学指纹图谱建立方法研究 2. 中药材、中药制剂指纹图谱鉴别计算方法 3. 中药药效组分筛选研究 4. 中药组效学研究方法 中药指纹图谱技术－多学科融合 （二）中药指纹图谱获取方法学研究 中药指纹图谱获取方法 样本采集和样本制备 采集－代表性和均一性：确定品种、药用部位、产地、采收期、炮制方法 制备－整体性和专属性：分步、系统提取 指纹图谱获取方法 色谱分离优化－时间（60min）与整体分离度 指纹图谱方法学验证 专属性、准确性、精密度、线性范围、灵敏度、稳定性、耐受性 1. 中药各类组分分步、系统提取 常规提取法： 水蒸气蒸馏法 水提法 水提醇沉法 有机溶剂提取法 分馏法 吸附法… 特殊制备方法： 超临界萃取 膜分离 分子蒸馏 微波萃取… 2. 一般未知体系色谱方法选择与优化 方法优化原则： 时间60min 整体分散（梯度洗脱） 整体检测（波长） 举例：痛必定注射剂指纹图谱 举例：痛必定注射剂指纹图谱 波长选择原则： 峰数量 基线 灵敏度 3. 指纹图谱分析方法验证实例 柱温 30℃下分离较好 不同仪器 不同厂家的仪器在泵流量精度、梯度混合方式、检测灵敏度、死体积大小等不同，从而导致色谱分离情况有异 3. 指纹图谱分析方法验证实例 色谱柱 不同厂家的同类型色谱柱（C18硅胶键合相）有一定差异 固定使用同一品牌不同批号的相同规格色谱柱对于样品的分离影响较小 应固定厂家同一型号的色谱柱 3. 指纹图谱分析方法验证实例 流动相 不同厂家的合格市售试剂对指纹图谱影响不大 微小改变TEA添加剂的浓度，色谱分离变化不大，但是基线会有一定程度偏移 应添加适中的添加剂 3. 指纹图谱分析方法验证实例 专属性考察 三点峰纯度紫外数据比较 （5%峰高处和峰极大值处； 0.80） 3. 指纹图谱分析方法验证实例 精密度 连续5次进样，相对保留时间和相对峰面积具有一致性 重复性 同一供试品5份样品测定，结果相似度在0.99以上 稳定性 考察了0，2，4，8，12，16，24小时的样品稳定情况，相对保留时间和峰面积偏差小于5% （三）中药指纹图谱特征性研究 中药指纹图谱特征性 复杂系统分析方法学研究 中药具有复杂系统的特点 中药的复杂系统观、中药复杂系统的分析策略 中药指纹图谱中成分指认 多种检测器（质谱、NMR）信息组合分析 指纹图谱特征信息提取与验证 指纹图谱特征信息归属与全方相关性研究 研究对象：复方清开灵注射液 清开灵全方HPLC-UV和LC/TOF-MS TIC图 未知成分筛查