(32)--10-基因工程制药实例-胰岛素生物技术制药.pptVIP

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2023-04-20 发布于陕西
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基因工程制药实例-胰岛素学习目标理解胰岛素相关结构知识掌握利用基因工程制药得到临床胰岛素的方法胰岛素相关知识胰岛素：胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质的刺激而分泌的一种蛋白质激素广泛调节细胞代谢促进细胞生长与分化调节血糖稳定1921年，胰岛素首次分离1923年，世界上第一支动物胰岛素上市1955年，胰岛素氨基酸残基序列首次被报道1965年，中国成功合成了牛胰岛素1979年，胰岛素基因被成功克隆1982年，第一支重组人胰岛素上市成熟胰岛素结构胰岛素过去生产情况猪牛胰腺胰岛素过去只能依靠从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素(0.004%)。目前重组人胰岛素的生产中应用的主要有两种宿主表达系统大肠杆菌表达系统酵母表达系统胰岛素过去生产情况大肠杆菌表达系统胰岛素分子加工成熟过程大肠杆菌表达系统优点表达量高，一般表达产物可以达到大肠杆菌总蛋白的20%~30%表达产物为不溶解的包含体，经洗涤后表达产物的纯度可以达到90%，易于分离纯化大肠杆菌表达系统缺点表达出的胰岛素无生物活性，需要复性才能显示其生物活性酵母表达系统酵母表达系统优点表达产物的二硫键结构位置都是正确的不需要复性加工处理，表达产物本身具有活性酵母表达系统缺点表达量低发酵时间长信号肽前肽序列KRB链连接短肽A链引导序列与胰岛素前体嵌合蛋白分子结构连接短肽替换基因重组技术表达胰岛素过程分离纯化及质量控制胰岛素原融合蛋白无序胰岛素原HBr裂解胰岛素原纯品纯化胰岛素粗品酶切微小胰岛素原溶液微小胰岛素原羧肽酶、胰酶超滤、离子交换吸附、沉淀等纯化酶切活性胰岛素离子交换层析、分子筛层析、反相层析、结晶大肠杆菌表达酵母菌表达人工合成胰岛素感谢聆听