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兽医微生物学教学单负链rna病毒;指基因组核酸为单股负股RNA的病毒。单负链病毒目主要包括以下病毒:副黏病毒科、弹状病毒科、丝状病毒科、波纳病毒科。它们的复制方式相似,均为核衣壳螺旋对称、出芽方式释放、有囊膜及膜粒。 ;;第一节 副黏病毒科(Paramyxoviridae);第5页/共56页;三、副黏病毒科的特性;第7页/共56页; 纤突具两种糖蛋白:
血凝素神经氨酸酶(HN)
融合蛋白(F)
它们在感染过程中发挥重要作用,HN介导病毒对细胞的吸附,F蛋白前体(F0)在细胞蛋白酶的作用下裂解成F1和F2,暴露出末端疏水区导致病毒与细胞融合。;四、兽医临床常见的副粘病毒 ;HN:具有具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)活性,构成病毒的大纤突
F蛋白:融合蛋白,构成病毒表面的小的纤突
L蛋白:为RNA依赖的RNA聚合酶,与核衣壳相连
NP:核衣壳蛋白
P:磷酸化核衣壳相联蛋白
M:基质蛋白
;HN蛋白的功能:
1、介导病毒颗粒吸附于靶细胞表面含有唾液酸的受体,启动感染过程;
2、神经氨酸酶活性是病毒复制中加强病毒颗粒的移动和促进从感染的细胞中释放出来的重要因素;
3、HN的另一个重要功能是促进F蛋白的细胞融合作用。;F蛋白的主要功能及作用:
①直接参与了NDV致病过程,在HN的协同作用下使病毒囊膜与宿主细胞膜的融合,病毒穿过细胞膜进入胞内,使红细胞溶解。
②F蛋白与病毒的毒力有关,在F0酶切位点,强毒株为RRQRR↓ F,而弱毒株为GGRQGR↓ L;
③F蛋白是主要的保护性抗原
④F基因是用于遗传学分析的主要基因。 ;致病机理;(3)NDV的血凝素: 可凝集人、鸡、豚鼠和小白鼠的红细胞。 ;;除鸡外,火鸡、鹌鹑、鸽子、孔雀可引起轻度或致死性感染
鸭、鹅及多种野禽隐性带毒
人类感染后48小时,发生急性结膜炎;高度接触性传染性、致死性疾病
发病率和死亡率在90%以上
发病后主要特征:呼吸困难,下痢,伴有神经症状;成鸡严重产蛋下降;粘膜和浆膜出血。
病毒存在于所有组织器官,体液,分泌物和排泄物中,以脑脾肺含毒量最高,以骨髓保毒时间最长。
;第18页/共56页;第19页/共56页;第20页/共56页;(7)诊断
;(8)防制;2、犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV);(3)临床症状:
犬瘟热的症状有胃肠型、呼吸型和神经型三种:
① 胃肠型:体温升高呈典型双相热,精神沉郁、厌食、频繁呕吐、腹泻、脱水。
② 呼吸型:鼻、眼有粘液和脓性分泌物(两侧),咳嗽(先干性后湿性),呼吸音粗。
③ 神经型:主要是嘴唇、眼睑抽动,流涎、空嚼等。当肌群(咬肌)反复、有节律的颤动时,对于诊断犬瘟热有重要的证病意义。;(4)发病机理
感染的自然途径主要是经上呼吸道,病毒主要从鼻、咽和呼吸道散播到支气管淋巴结和扁桃体,病毒被淋巴细胞携带入血流,产生初始毒血症,并伴有第一次发热;病毒继续散播至网状内皮系统,在淋巴器官增殖的病毒被淋巴细胞及单核细胞携带进入血流产生第二次病毒血症,伴有第二次体温升高。;(5)症状 ;症状可以分为:;呼吸道炎症;第29页/共56页;消化道炎症;第31页/共56页;以神经症状为主;第33页/共56页;皮肤症状;第35页/共56页;(6)诊断
① 根据临床症状可作出初步诊断。
② 免疫荧光:涂片或冷冻切片检查感染组织中病毒抗原。
③ 包涵体鉴定: 神经元或上皮组织中嗜酸性包涵体。
④ 血清学诊断:
IgM的检测(病毒中和试验/ELISA试验/间接免疫荧光);抗原的检测(免疫胶体金快速检测试纸)。
⑤ 病毒分离,取病畜淋巴细胞,病毒经传代后可在MDCK、Vero等细胞生长。
⑥ RT-PCR;第二节 弹状病毒科( Rhabdoviridae ); 弹状病毒科的特性
1、子弹状,70×(130-380) nm;
2、单分子单股负股RNA,约11~15kb;
3、核衣壳螺旋对称,有囊膜;
4、病毒在细胞质内复制;
5、抵抗力较强,但对热、紫外线、去垢剂敏感。;狂犬病毒(Rabies virus);形态结构
(1)病毒外形呈弹状(60~400nm×60~85nm),内含衣壳呈螺旋对称。核酸是单股不分节负链RNA。
(2)基因组长约12kb,从3′到5′端依次为编码N、 P、 M、 G、L蛋白的5个基因。G蛋白在囊膜上构成病毒刺突,与病毒致病性有关,N蛋白为核蛋白有保护RNA功能。G蛋白和N蛋白是狂犬病病毒的主要抗原。;抵抗力
狂犬病病毒对热、紫外线、日光、干燥的抵抗力弱,加温50℃1小时、60℃5分钟即死,也易被强酸、强碱、甲醛、碘、乙酸、乙醚、肥皂水及离子型和非离子型去污剂灭活。于4℃可保存一周,如置50%甘油中于室温下可保持活
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