生物化学仪器分析-紫外.pptVIP

* * §3.1.4 蛋白质紫外吸收光谱 蛋白质具有很强的紫外吸收，通常情况下一般蛋白质在紫外区的最大峰在280nm左右(见图2．8)。 第四十九页，共九十二页。 * * §3.1.4 蛋白质紫外吸收光谱 利用蛋白质的这一特性，能够设计多种蛋白质定量分析的方法。同时，蛋白质的最大吸收峰不同于核酸的260nm最大吸收峰。 基于这种差异，仍然能够利用紫外吸收对含有DNA的蛋白质样品进行定量分析。 在小于240nm波长的紫外区有很强的光吸收效应，但较难利用这一特性。这是因为，在这一紫外区，很多缓冲液具有很强的紫外吸收，并且缓冲液一般浓度很高，这会严重干扰蛋白质的定量分析。但如果背景缓冲液不具有紫外吸收的特性，则可以充分利用蛋白质在200～220nm的强紫外吸收性质。 第五十页，共九十二页。 * * §3.1.4 蛋白质紫外吸收光谱 蛋白质的紫外吸收特性主要是由蛋白质所含的酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸等引起。 由于苯环(包括共轭双键等)的存在，这几种氨基酸在240～300nm的紫外区内均具有强力的光吸收特性；虽然其他氨基酸也具有紫外吸收的性质，但在此紫外区内一般很弱，对蛋白质的紫外吸收贡献不大。 第五十一页，共九十二页。 * * §3.1.4 蛋白质紫外吸收光谱 蛋白质的紫外吸收受多种因素的影响。 由于蛋白质分子为高分子聚合物，其构象受多种 因素(如溶液的pH、离子强度、金