实验四斐林试剂法法测定还原糖含量.docxVIP

一、实验目的： 掌握园艺产品中糖的测定方法。 二、实验原理 利用糖的还原性，与斐林试剂（氧化剂）中的二价铜离子还原为一价铜，进行氧化还原反应，而进行测定。非还原糖必须转化为还原糖，再进行测定。 斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反应的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下还原呈无色。根据斐林试剂完全还原所需的还原糖量，计算出样品还原糖量。 三、试剂与材料 1、斐林试剂 甲： 加水溶解并定容至 1000ml； 乙：346g 酒石酸钾钠+100gNaOH 加水溶解并定容至 1000ml； 2、1%次甲基蓝，1g 次甲基蓝加水溶解并定容至 100ml，棕色瓶保存； 3、%标准葡萄糖，2g 105℃烘干到恒重的葡萄糖加水定容到1000ml； 4、碱式滴定管； 5、电炉，各种玻璃器皿。 四、操作方法 1、斐林试剂标定 取甲液 5ml 加入 5ml 乙液中，置于250ml 三角瓶中，加入水10ml，从滴定管中加入%的标准葡萄糖若干毫升（约 23ml）。（量控制在后滴定时消耗葡萄糖在－。 电炉上加热至沸，并保持微沸 2 分钟，加 2 滴 1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒 1 滴的 速度继续滴加葡萄糖标准溶液，用%标准葡萄糖滴定至蓝色消失，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。记录耗用的葡萄糖量为V ，必须在 1min 内完成。 0 （注意：还原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必 须保持溶液成沸腾状态，并且避免滴定时间过长。） 2、样品滴定预备试验 同上法取斐林试剂，加 10ml 样品液，摇匀于电炉上加热至沸，保持微沸 2 分钟，加 2 滴 1%次甲基蓝，用%葡萄糖滴定至蓝色消失。记录耗用的葡萄糖量为V 。 1 3、样品滴定 同上法吸取斐林试剂加 10ml 样品液(预先稀释)，补加（V -V ）ml 水，并从滴定管中预 0 1 先加入（V -1）ml %葡萄糖，摇匀至电炉上加热至沸，保持2min 微沸，加入 2 滴 1%次甲基 1 蓝，继续用葡萄糖滴定至蓝色消失。记录消耗的标准葡萄糖体积为V 毫升。 五、结果计算 还原糖含量(以葡萄糖计)（g/ml)=（Vo-V)××1/10×n 式中：Vo 斐林试剂标定值，ml V 样品糖液测定值，ml 标准葡萄糖溶液浓度，g/ml 10 样品糖液体积，ml n 样品稀释倍数 六、思考题： 1、还原糖测定方法有哪些？ 2、总结本实验方法测定还原糖应注意哪些事项？