食品分析实验香肠中亚硝酸含量的测定.docVIP

实验十三　香肠中亚硝酸含量的测定 1、实验内容 用N-1-萘基乙二胺比色法测定香肠中亚硝酸含量。 二、实验目的与要求 1、熟练掌握样品制备、提取的基本操作技能。 2、进一步熟练掌握分光光度计的使用方法。 3、掌握N-1-萘基乙二胺比色法测定亚硝酸盐测定的原理及操作。 三、实验原理 样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与盐酸萘乙二胺发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物（染料），在550nm处有最大吸收，其颜色深浅与亚硝酸含量成正比，故可比色测定。 四、试剂 （1）pH9.6～9.7氯化铵缓冲液：1L容量瓶中加入500 mL水，准确加入20.00 mL盐酸，振摇混匀。准确加入50mL氢氧化铵，用水稀释至刻度，必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试pH至所需范围。 （2）0.42mol/L（1/2硫酸锌）溶液：称取120 g硫酸锌，加水溶解并稀释至1000mL。 （3）20g/L氢氧化钠溶液：称取20 g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1000mL。 （4）对氨基苯磺酸溶液：称取10g对氨基苯磺酸，溶于700 mL 和300 mL冰乙酸中，置于棕色瓶中摇匀，避光室温保存。 （5）1g/L盐酸萘乙二胺溶液：称取0.1 g盐酸萘乙二胺，溶于100 mL60%乙酸溶解均匀，置于棕色瓶中摇匀，在冰箱储存，一周内稳定。 （6）显色剂：临用前将1g/