哈尔滨工程大学《细胞生物学》课件-第7章干细胞.pptxVIP

哈尔滨工程大学《细胞生物学》 ;1. 干细胞(stem cell)： 干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。 ;2.干细胞分类 (1)胚胎干细胞：指胚胎早期的干细胞。这类干细胞分化潜能宽，具有分化为机体任何组织细胞的能力。如囊胚期内细胞团的细胞。 (2)成体干细胞：指成体各组织器官中的干细胞，成体干细胞具有自我更新能力，但分化潜能窄，只能分化为相应(或相邻)组织器官组成的细胞。如神经干细胞，表皮干细胞。;;第一节 干细胞生物学 ;1．干细胞的形态特征;2．干细胞的生化特性;（一）增殖缓慢性;2．过渡放大细胞： 过渡放大细胞是介于干细胞和分化细胞之间的过渡细胞，过渡放大细胞经若干次分裂产生分化细胞。 通过这种方式，机体可用较少干细胞获得较多分化细胞。;3．干细胞增殖缓慢的意义： (1)利于干细胞对外界信号作出反应，以决定细胞的发展方向—增殖或分化。 (2)减少基因突变的危险。增殖缓慢使干细胞有时间发现并纠正处于增殖周期过程中的错误。;（二）干细胞的自稳定性;2．干细胞的分裂方式 ①干细胞有对称与不对称两种分裂方式。;不对称分裂的结果使两个子细胞一个成为功能专一的分化细胞；另一个保持干细胞的特征。 3. 不对称分裂发生原因： ①系列基因调控。 ②细胞质物质不均等分配。;三、干细胞的分化特征 ;（一）干细胞的分化潜能 ;(二)干细胞的转分化和去分化 ;2．干细胞去分化： 一种干细胞向其前体细胞的逆向转化称干细胞去分化。 实验： 成体鼠造血干细胞 鼠卵泡的内细胞团 表达胎鼠的珠蛋白基因→参与胚胎造血系统的发育。 ;3. 干细胞的可塑性;干细胞横向分化表明成体干细胞被移植入受体中具有很强的可塑性。为干细胞治疗提供了可能。 (2)实验： 小鼠肌肉干细胞→体外培养5天＋少量骨髓间质细胞 接受致死量辐射的小鼠中 各种血细胞系。;(3)横向分化的调控机制： 与干细胞的微环境有关。 干细胞进入新的微环境后，对分化信号的反应受到周围正在进行分化细胞的影响，从而对新的微环境中的调节信号做出反应。;四、干细胞增殖与分化的微环境 ;如： 这些物质可以介???干细胞-干细胞的相互作用，以及细胞与细胞外基质的作用，影响干细胞的增殖和分化。;（一）分泌因子 ;（二）受体介导的细胞-细胞相互作用 ;(三) 胞间基质和整合素;3.细胞外基质的种类：;第二节 胚胎干细胞 ;1．胚胎干细胞： 从囊胚期(受精后5~7天)胚胎分离到的干细胞称胚胎干细胞。 2．胚胎干细胞的特性： 为全能性干细胞。有如下特性：;3．胚胎干细胞的研究价值： 是发育生物学基础研究的理想模型和有效工具。;一、人胚胎干细胞的获得;1．从早期胚胎获得 美国Thompson研究小组是从囊胚期胚胎的内细胞团中获得胚胎干细胞 ： 体外受精卵 囊胚期 去除滋养层→内细胞团 得5株干细胞系 32代(8个月)保持未分化状态 。;2．从原始生殖细胞获得 gearhart小组： 流产胎儿性腺嵴 　　原始生殖细胞 　获得5个多能干细胞系 7个月不分化 。 思路：原始生殖细胞是未分化细胞。 ;3．体细胞移植 分化细胞核(乳腺、皮肤细胞) 去核卵细胞→杂合细胞 发育成囊胚 胚胎干细胞 成体(如多利羊)。;二、胚胎干细胞的主要特征 ;（一）形态和生化特征 ;4. 干细胞表面免疫原性：一般表达胚胎早期的表面抗原，而且有种属差异。 如小鼠胚胎干细胞表达胚胎阶段性特异抗原-1(SSEA-1)，不表达SSEA-3或SSEA-4； 人胚胎干细胞表达SSEA-3或SSEA-4。;(二)干细胞的分离与纯化;(三)干细胞的体外培养;1· 培养条件： 需要许多生长因子和间质细胞的共培养。 如Brustle等在体外培养了鼠的ES细胞。 分离ES细胞 培养 培养 生长增殖 保持分化潜能。 停止供给生长因子，ES细胞分化为寡树突细胞或星状细胞。;2· 分化诱导 在应用前还需依据靶组织类型对培养干细胞进行定向分化诱导。 分化诱导需了解： ①干细胞发育有关的信号调节； ②干细胞发育的微环境。;（四）胚胎干细胞的分化潜能 ;实验1：移植实验 人胚胎干细胞 小鼠体内 畸胎瘤(良性)→有三个胚层产生的组织： ;三、胚胎干细胞研究的