实验动物饲养—实验动物设施消毒与灭菌（实验动物）.pptx

项目三 实验动物的饲养 任务四实验动物设施消毒与灭菌 任务描述知识平台任务实施 *任务描述 了解实验动物设施消毒灭菌的方法，消毒液的配制和使用，并实际在实验动物设施内进行消毒灭菌工作，填写相应的记录表。 知识平台 知识平台一、消毒与灭菌二、实验动物环境设施常用消毒灭菌方法三、饲育器具消毒与灭菌四、各种区域的消毒与灭菌五、SPF级饲育室的消毒六、消毒工作中的个人防护1. 饲育架 耐热性较好的饲育架，可以用高压蒸汽灭菌 (121℃，20 ~30 min) ，高压蒸汽灭菌前，先将饲育架完全清洗干净，并擦干。 三、饲育器具消毒与灭菌2. 饲育笼 耐热饲育笼采用高压蒸汽灭菌。在灭菌前，需要先去除笼内污物(垫料等)，将饲育笼在温水中浸泡一晚，充分清除笼内污迹，洗净饲育笼。最后送入灭菌器中进行灭菌（121℃，20 ~ 30 min）。 3. 垫料一般情况下，垫料采用高压蒸汽及干热灭菌方法。（1）高压蒸汽灭菌：垫料放入不锈钢容器中，或者直接按每个饲育笼的需要量装入笼子中一起灭菌，一般装入2 ~3 cm 高。灭菌时间一般为 40 min( 121℃) ，干燥时间20min . （2）干燥灭菌用耐热的不锈钢容器，垫料放入八成左右，或直接按每个饲育笼的需要量装入饲育笼中一起灭菌，一般装入2 ~3 cm 高，然后放入到干热灭菌器中，进行 180℃30 min 灭菌处理。 4. 饲料盒、饮水瓶（1）消毒在进行消毒和灭菌之前，均应清除饲料盒、饮水瓶中的饲料、饮水等，洗去附着的污物。用次氯酸钠浸泡饲料盒、饮水瓶一个晚上，清洗干燥后放在规定的清洁场所。 （2）灭菌 在温水槽中将饲料盒、饮水瓶中残留的饲料等污物浸泡一个晚上，以中性洗涤剂充分洗净，放在大小适当的容器中送入高压灭菌器。 5. 饲料 将饲料装入饲料箱放入高压灭菌器中，箱与箱之间不要重叠，上下应有一定的间隙 。灭菌时间一般为121℃30 ~40 min ，干燥20 ~30 min 6. 饮水 饮水一般采用高压蒸汽灭菌。将耐热性水瓶充分洗净后，装入 80%经过滤后的自来水，盖上水瓶盖，放入耐热性容器中。 7. 实验器具实验用的器具有各种形状、大小和材料等。一般根据其使用方法和目的进行适宜的灭菌或消毒处理。操作时先清除实验器具上的污物，然后再进行适当的灭菌或消毒处理，送入清洁区域保存。 8. 工作服可用洗衣机洗涤，干燥30分钟后，用包装袋包装后放入灭菌器内。灭菌时间一般为 40 min (121℃) ，干燥30min，放在固定的场所保管。 9. 其他包括需要消毒灭菌的工作车、拖鞋、笔记用品、门把手等。（1）灭菌工作车一般用高压蒸汽灭菌，条件 121℃20 min。拖鞋、笔记用品等一般用环氧乙烷灭菌。可将环氧乙烷灭菌器加热至 60℃，灭菌3小时，取出衣服放在规定的清洁区域保管。 （2）消毒作业车、拖鞋及门把手用消毒液消毒，将作业车、拖鞋洗净后揩干，用 70% 酒精，或 50% 异丙醇喷雾，门把手则用揩布蘸取药剂后擦拭。 1. 验收、检疫区域此区域因为经常性地搬入物品、动物，如果带入污染物，那么 此区域极易被污染，因此必须每天进行整理、整顿、消毒。 四、各种区域的消毒与灭菌2. SPF 动物的饲育区域 3.无菌动物、悉生动物饲育区域 五、SPF级饲育室的消毒 日常操作原则上每天对清洁物品贮藏室、浴室、缓冲间及走廊等进行空气消毒，定期操作则以周为单位，对屏障内所有区域进行消毒 。 1. 消毒药的选择 一般选广谱消毒剂、卤化物消毒剂(次氯酸钠、碘伏等)、逆性皂液(界面活性剂)、过氧化物消毒剂(过氧酸)及季胺类(如新洁尔灭)消毒剂等并用。传递窗的消毒也可使用酒精、洗必泰 、新洁尔灭等。手指用以用消毒液浸泡或喷雾后擦干，戴上手套。按照进入屏障设施的要求穿上无菌服进入动物室。加料、给水作业结束后，笼架上的垫料、饲料残渣用刷子或揩布扫清 。地板上的污物、垫料、饲料残渣要清扫干净 。室内排气口的初效过滤器，每周用水清洗一次笼架擦拭消毒 2. 日常消毒操作 层流架上的初效过滤器同样一周清洗一次 。使用后的清扫用具，用上述消毒药消毒后，尽量保持干。SPF 饲育区域内的缓冲间、走廊、更衣室打开紫外线灯。使用后的专用灭菌衣，装入带盖的容器内收容，洗净灭菌后待用 。 3. 定期消毒操作（1）笼子、垫料、托盘、饲料盒、饮水瓶等，使用前用高压灭菌器灭菌，笼子和垫料每周换1 次以上，笼盖、料盒 1月换一次以上，饮水瓶每周换 2 次以上，专用容器从传递窗、缓冲间搬出后洗净、灭菌 。（2）不能用高压灭菌器灭菌的架子、饲育装置，每周 1 次以上用 200 x 10-6次氯酸钠液或0.1% 逆性皂液或含有效碘1000 x 10-6 的碘伏清拭消毒。（3）SPF 饲育区内，尽量少用水，以保持干燥状态。