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微生物的的学习资料第1页/共89页 Cncnc-micro测定微生物生长繁殖的方法微生物的生长规律影响微生物生长的主要环境因素微生物培养法概论微生物生长繁殖的控制内容提要? ? ? ?? 第2页/共89页 测生长量计繁殖数测定生长繁殖的方法测定生长繁殖的方法Cncnc-micro微生物的纯培养第3页/共89页 纯培养的分离方法 稀释倒平板法 划线法 选择培养基分离法 单细胞挑取法 第4页/共89页 Viable cell count1.dilute sample1 ml9 ml10 100 1000 104 105 106 107cell no/ml2. plate out 0.1 ml 第5页/共89页 Inoculating an agar plate to obtain single colonies第6页/共89页 Mixed culturePure culture第7页/共89页 Mixed cultureOral swabSwab from sole of shoe第8页/共89页 Each colony was examined microscopically第9页/共89页 选择培养基分离法1.dilute sample1 ml9 ml10 100 1000 104 105 106 107牛肉膏培养基土豆培养基高氏培养基第10页/共89页 ……含N量法DNA/RNA法叶绿素法菌体内重要组成测定法测生长量(直接法)称重量法测体积法N×6.25=PrCncnc-micro第11页/共89页 比 浊 法生理指标法测生长量(间接法)第12页/共89页 计繁殖数比例计数法血球计数板法液体稀释法平板菌落计数法滤膜培养法各种型号的全自动血球计数仪第13页/共89页 微生物的连续培养微生物的生长规律微生物的个体生长和同步生长Cncnc-micro单细胞微生物的典型生长曲线微生物的高密度培养第14页/共89页 离心法抑制ＤＮＡ合成法获得同步生长(synchronous growth)的方法：诱导法选择法过滤法同步培养(synchronous culture)Cncnc-micro使培养基中细菌同时分裂，处于相同的生长阶段叫同步生长。第15页/共89页 生长曲线(growth curve)描述细菌生长规律总菌数活菌数培养时间 Ⅱ.指数期Ⅲ.稳定期Ⅳ.衰亡期Ⅰ.延滞期细菌数目（个/ml）对数ⅡⅢⅣⅠ第16页/共89页 缩短延滞期的意义和方法延滞期(lag phase)出现原因本期特点影响本期限长短因素Cncnc-micro第17页/共89页 延滞期出现原因 把细菌接种到新鲜的培养基中培养时，并不立即进行分裂繁殖，细菌增殖数为０，这时需要合成多种酶，辅酶和某些中间代谢产物，要经过一个调整和适应过程 。Cncnc-micro第18页/共89页 延滞期特点生长速率常数等于零菌体粗大 代谢活力强对不良条件抵抗能力降低ＲＮＡ含量增加Cncnc-micro第19页/共89页 影响延滞期限长短因素接种龄接种量培养基成分Cncnc-micro第20页/共89页 缩短延滞期的意义和方法可以缩短生产周期，提高设备利用率。接种对数生长期的菌种，采用最适菌龄 加大接种量用与培养菌种相同组成分的培养基Cncnc-micro第21页/共89页 指数期(对数期)(exponential phase) 特点该期的细菌生产中多被用做种子和科学试验材料 ①活菌数和总菌数接近 ②酶系活跃，代谢旺盛。③生长速率最大，generation time最短。④细胞的化学组成及形态，生理特性比较一致Cncnc-micro第22页/共89页 x2x1t2t1培养时间Lg 细胞数/mlt2 - t13.322(lgx2-lgx1)生长速率常数R=t2 - t13.322(lgx2-lgx1)代时G=指数期生长的数学模型繁殖代数 n=3.322(lgx2-lgx1)第23页/共89页 影响指数期的因素菌种营养成分营养物浓度培养温度Cncnc-micro第24页/共89页 稳定期(stationary phase)出现原因 营养的消耗有害代谢产物积累PH值EH值等理化条件不适出现原因Cncnc-micro营养物比例失调第25页/共89页 稳定期特点活菌数保持相对稳定，总菌数达最高水平。细菌代谢物积累达到最高峰。芽孢杆菌这时开始形成芽孢。这是生产收获时期。Cncnc-micro第26页/共89页 衰亡期(decline phase/death phase)特点细菌死亡数大于增殖数,活菌数明显减少,群体衰落 细胞出现多形态,大小不等的 畸形,变成衰退型 细胞死亡,出