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实验二凝集沉淀反应;实验二 凝集、沉淀反应;实验目的;1.直接凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体结合后所呈现的肉眼可见的凝集现象。 。
2.沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体在适当条件下结合而出现的沉淀现象。
; 伤寒杆菌诊断血清、伤寒杆菌菌液、生理盐水、
载玻片、接种环、记号笔、酒精灯；琼脂板、打孔器、针头、毛细滴管、待测血清、 AFP阳性血清、AFP诊断血清（兔抗人AFP ）等。
;抗原抗体反应又称血清学反应，主要有：
1、凝集反应
2、沉淀反应
3、补体参与反应
4、中和反应
5、免疫标记技术;一、凝集反应
(一)概念
颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应抗体结合，在一定条件下，出现肉眼可见的凝集物，称为凝集反应。;原理
玻片凝集试验是一种快速简便的检测方法，即抗原抗体的反应在玻片上进行，是一种定性的试验。用已知抗体检测未知抗原。
本试验用已知的伤寒杆菌标准诊断血清鉴定未知细菌。;
取洁净玻片1张，用蜡笔划分2等份，如下图所示 ；
无菌操作，用接种环分别于一、二格内各加2～3环伤寒杆菌诊断血清、生理盐水；
用接种环取待测菌液，分别涂布于生理盐水和伤寒血清中，混匀；
轻轻摇动玻片，1~2分钟后观察结果。
;盐水侧无凝集颗粒；
血清侧出现肉眼可见的凝集块为阳性，仍为均匀一致乳浊液者为阴性。;经典抗原抗体反应的一种。
分类:
琼脂扩散
环状沉淀反应
絮状沉淀反应
免疫电泳; 琼脂扩散试验：
琼脂是一种含有硫酸基的多糖体，高温时溶于水，冷却后凝固，形成凝胶，呈多孔结构，充满水分，允许各种抗原抗体分子自由扩散。二者于比例适当处相遇，发生沉淀，形成可见的沉淀带。;（一）单向琼脂扩散试验 （示教）;单向琼脂扩散实验:;（二）双向琼脂扩散试验 （操作）;材料：
待测血清、 AFP阳性血清、AFP诊断血清（兔抗人AFP ）、生理盐水、琼脂板、打孔器、针头、毛细滴管、酒精灯。
;1、制备琼脂板：
1%盐水琼脂加热溶化，取5ml均匀铺与载玻片上。
2、打孔：
琼脂凝固后，用打孔器打孔成梅花型，针头取出孔中琼脂。
3、封底：
用酒精灯轻烤平??底部至琼脂刚刚要熔化为止，封闭孔的底部，以防侧漏。
4、加样：
中间孔加抗AFP抗体，1、4孔加AFP阳性对照，2、3孔加待检血清，5、6孔加生理盐水。
5、反应：
于湿盒，37?C 24h。;;1、琼脂板一定平整、光滑 (无气泡)，琼脂不可过厚；
2、打孔不要划破边缘；
3、加样要加满而不溢出为止；
4、合理分配吸管，Ag、Ab吸管不能混淆。;凝集反应与沉淀反应的比较;思考题;作业;感谢您的欣赏
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