DNA损伤与修复和染色质维护.pptxVIP

第1页/共55页DNA损伤与修复和染色质维护第2页/共55页第4章：DNA损伤与修复和染色质组装与维护第一节 DNA损伤的修复及其他响应系统第二节 染色质组装与染色质组装因子第三节 RecQ螺旋酶和CAF-1与基因组稳定性第3页/共55页细胞中的DNA包含着完整的遗传信息，真核生物DNA与组蛋白相互作用形成高度有序的染色质。DNA与染色质在配子与合子形成、以及之后个体生长发育的细胞活动与基因表达过程中，都处于一种动态变化。正常细胞具有一整套修复DNA损伤和染色质维护系统，以维持基因组稳定与DNA的完整，确保遗传信息准确无误地传至下一代，以及细胞功能的正常执行。DNA损伤及其修复与染色质组装及其维持，都直接损害基因组的稳定性。基因组的稳定性遭到破坏，会导致多种遗传、代谢性疾病或肿瘤的发生。因此对基因组稳定性调控和DNA修复机制的研究，是生物医学科学的重要领域。第4页/共55页第一节 DNA损伤的修复及其他响应系统一、DNA损伤（DNA damage)DNA损伤即DNA分子物质的损伤。 生物体细胞中的DNA 每时每刻都在遭受着损伤，有研究估测人的每细胞每天会有1~100万个的分子伤害，虽然即便是100万个的分子伤害近相当于人基因组的百万分分之1.65（按人的双倍体基因组的含60亿对碱基推算）。但如果有伤害发生在关键的基因(如抑癌基因)而未能修复，就会障碍细胞执行其应有的能力， 并明显增加形成肿瘤的可能性和有利于肿瘤异质性。机体内与体外环境中有多种因素可以导致DNA的不同损伤。体内：DNA复制与染色质组装错误、自发性损伤、代谢副产物 如活性氧物质ROS 、自由基等。因素物理因素：如X、γ射线，紫外线，亚原子微粒等化学因素：直接致癌或间接致癌的化学物质等生物因素：病毒、霉菌等环境：第5页/共55页DNA损伤的类型包括碱的基缺失、修饰、错误；DNA链间和分子的交联；以至于DNA单、双链的断裂等类型。(1)碱基缺失(base loss) DNA上的脱氧核糖和碱基的糖苷键在生理条件下并不太稳定，哺乳动物细胞中每天会有几千个嘌呤和几百个嘧啶的自然缺失，产生无嘌呤或无嘧啶位点 (AP site, apurininc/apyrimidic site)(thermal disruption? depurination)图5-1　碱基缺失 第6页/共55页C UA I(2)碱基修饰(base modification)—主要3类脱氨基: 核酸碱基上的氨基也有些不稳定，胞嘧啶C4 脱氨基：C?U)，5mC?T。发生率：每单倍体基因组每天以这种方式产生大约100个尿嘧啶。 其他的脱氨基反应包括腺嘌呤(A)或鸟嘌呤(G)转变为次黄嘌呤(I)（hydrolysis of bases）(5mC) (T)45326(CH3)(CH3)1(5’-methyl-)(thymidine)(G)(NH2)(guanine)图5-2　脱氨反应 第7页/共55页化学修饰: DNA可以被很多化学修饰 。细胞氧化代谢过程中，或细胞受到电离辐射作用后 会产生一些活性氧（纯态氧、过氧化氢物自由基、过氧化氢，羟自由基），活性氧能对碱基进行化学修饰，最普通的例子是胸腺嘧啶变成胸腺乙二醇（图5-3）(oxidation) 。图5-3　氧化修饰 除活性氧外，环境中的许多化学物质是烷化剂，可以使DNA加上甲基或其他烷基基团，哺乳动物二倍体基因组每天可以产生好几千个烷化的碱基。(alkylation)光损伤: 细胞受到 X 光、紫外线照射后，其能量能使DAN发生一些化学反应，最常见的是产生一个新的化学键而形成环丁烷嘧啶二聚体(cyclobutane pyrimidine dimers ，CPDs), 其中 T-T CPDs 最常见，T-C/C-T 其次，C-C较少。（图5-4）图5-4　胸腺嘧啶二聚体Thymine Dimer第8页/共55页(3)复制错误( replication errors)尽管DNA聚合酶非常精确，而且大多数复制过程中产生的错误都会被迅速消除，但复制系统并非完美，DNA复制过程仍然会产生碱基的错配、插入或丢失的错误。(4)链间交联( interstrand crosslinks，ICLs) 指不同DNA链上的碱基间发生连接，主要由一些双功能烷化剂如补骨脂素(psoralens) 引起，UV 照射与电离辐射也会导致链间交联(5) DNA-蛋白交联( DNA-protein crosslinks) DNA拓扑异构酶在催化反应时会与DNA之间形成共价键，通常这种共价键是瞬时可逆的，但偶然也会发生这个共价键没及时断开而形成DNA与蛋白之间稳定的交联。(6) DNA 断裂( DNA strand breaks) 正常细胞代谢过程中，拓扑异构酶