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血液一般检验红细胞部分下; 【检测原理】HCT直接测定采用离心法,间接测定采用血液分析仪法。
1.离心法 常用微量法和温氏法,其检测原理基本相同,但离心力不同。血液离心后分5层,自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。读取结果以还原红细胞层为准(图2-19)。; 2.血液分析仪法 由红细胞计数和红细胞平均体积导出HCT,HCT=红细胞计数×红细胞平均体积。
【方法学评价】HCT测定的方法学评价见表2-18。;第4页/共45页;【质量保证】 ; 【参考区间】 ①成年 男性:0.40~0.50;女性:0.37~0.48。②新生儿0.47~0.67。③儿童:0.33~0.42。
【临床意义】HCT的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标,若红细胞数量正常,血浆量增加,为假性贫血;HCT增加可因红细胞数量绝对增加或血浆量减少所致(表2-19)。HCT的主要应用价值为:
1.临床补液量的参考
2.真性红细胞增多症诊断指标
3.计算红细胞平均指数的基础;第7页/共45页;五、红细胞平均指数
红细胞平均指数包括红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白量(MCH)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)。红细胞平均指数有助于深入认识红细胞特征,为贫血的鉴别诊断提供线索。; 【检测原理】
1.手工法 根据RBC、Hb、HCT测定结果计算红细胞平均指数(表2-20)。
2.血液分析仪法 MCV由血液分析仪直接测定导出;由仪器测定HGB、RBC可计算出MCH=HGB/RBC;MCHC=HGB/(RBC×MCV)。;第10页/共45页; 【方法学评价】手工法红细胞平均指数由RBC、HGB、HCT测定后计算而来,因此,必须采用同一抗凝血标本,且所检测的结果必须准确。仪器法红细胞平均指数的测定同样依赖于RBC、HGB和MCV测定的准确性。; 【参考区间】MCV、MCH、MCHC的参考区间见表2-21。; 【临床意义】红细胞平均指数可用于贫血形态学分类(表2-22)及提示贫血的可能原因。但红细胞平均指数仅反映了红细胞群体平均情况,无法阐明红细胞彼此之间的差异。 ;图2-20 网织红细胞;第15页/共45页; 网织红细胞检测的目的:
①鉴别贫血的类型(增生性、非增生性、增生增高性)。
②检查骨髓的功能。
③检测贫血的治疗效果。
④评估骨髓移植后、再生障碍性贫血细胞毒药物诱导治疗后或EPO治疗后的红细胞造血情况。 ; 【检测原理】
1.普通显微镜法 活体染料的碱性着色基团可与网织红细胞RNA的磷酸基结合,使RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩,形成蓝色的点状、线状或网状结构。
2.血液分析仪法 特殊染料与网织红细胞中RNA结合后进行RNA定量,可精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret%),并可根据RNA含量将网织红细胞分类及计算网织红细胞其他参数。; 【方法学评价】网织红细胞计数的方法学评价见表2-24。; 【质量保证】以手工计数法为重点。
1.选择合适的染料 用于网织红细胞检测的活体染料很多,有煌焦油蓝(?brilliant cresyl blue)、新亚甲蓝(?new methylene blue)、中性红、亚甲蓝、甲苯胺蓝等。网织红细胞活体染料的评价见表2-25。;第20页/共45页; 2. 正确辨认网织红细胞 外周血液网织红细胞主要为Ⅳ型,凡含有2个或2个以上颗粒、且颗粒必须远离细胞边缘的红细胞均应计为网织红细胞。红细胞各种颗粒或包涵体的鉴别见表2-26。 ;第22页/共45页; 3.网织红细胞计数方法
(1)Miller窥盘法:ICSH及我国卫生部临床检验中心推荐使用Miller窥盘法(图2-21)进行网织红细胞计数。
(2)显微成像系统:; ICSH建议,为控制CV在10%内,应根据网织红细胞比率,决定在连续视野中Miller窥盘小方格内实际需要计数的红细胞数量(表2-27)。; 【参考区间】
①成人、儿童:0. 5℅~1.5℅。
②新生儿:2.0℅~6.0℅。
③成人绝对值:(24~84)×109/L
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