实验酶促反应动力学.pptxVIP

实验酶促反应动力学;【实验目的】 1. 了解pH、温度、激活剂、抑制剂对酶活力的影响。 2. 学习测定酶最适pH值的 方法。;【实验原理】 ; 激活剂能增加酶的活力，抑制剂会降低酶的活力。如 Cl-: 唾液淀粉酶的激活剂，Cu2+则是该酶的抑制剂。 ; 淀粉及其水解产物遇碘呈现不同的颜色：  淀粉呈兰色； 大分子糊精（紫色糊精）呈紫色 ； 其次的糊精（红色糊精）呈红色； 小分子糊精及麦芽精为无色。; ;（二）试剂 1.含有0.3％NaCl的0.5％淀粉溶液  2. 0.2mol／L Na2HPO4溶液 3. 0.1mol／L柠檬酸溶液 4. KI－I2溶液 5. 新鲜唾液;【实验步骤】 1. pH值对酶活力的影响 (1)取干燥试管6支, 编号，按下表制备 pH 5.0 ～8.0的5种缓冲溶液。; (3) 测定淀粉完全水解所需的时间： 先向第6号试管中加稀释50～200倍的唾液2ml，摇匀后放入37℃恒温水浴中保温,检测淀粉水解程度,并测定淀粉完全水解所需的时间。; 按照第6号试管的保温时间，依次将各管迅速取出，并立即加入KI－I2溶液2滴，充分摇匀。观察各管呈现的颜色， 观察pH对唾液淀粉酶活力的影响，并确定其最适pH。;2. 温度对酶活力的影响 取试管3支，编号后按下表加入试剂： ;3. 激活剂和抑制剂对酶活力的影响 （1）取试管3支，按下表编号加入相应试剂： ;【注意事项】 pH值对酶活力的影响实验： 1.掌握第6号试管的水解程度是本实验成败的 关键之一。 2.严格控制温度。在保温期间，水浴温度不能 波动，否则影响结果。 3.严格控制反应时间, 保证每管反应时间相同。 激活剂、抑制剂对酶活力的影响： 每管中加入的底物应是不含NaCl的1％淀粉 溶液。;感谢您的欣赏