蛋白质生物合成及加工.pptxVIP

第1页/共66页蛋白质生物合成及加工第2页/共66页第16章 蛋白质生物合成及加工第一节 遗传密码的破译第二节 蛋白质的合成过程第三节 蛋白质的加工、修饰及转运第3页/共66页第一节 遗传密码的破译mRNA的翻译:按照mRNA上密码子的信息指导氨基酸单体合成为多肽链的过程.将mRNA中4种核苷酸的语言解读为蛋白质中20种氨基酸的语言——翻译（Translation）第4页/共66页蛋白质的合成发生在粗面内质网上20世纪50年代Paul Zamecnik将同位素标记的氨基酸注射到大鼠体内,分析不同时间肝脏内氨基酸的分布.时间长了会在任何地方都有,但注射后数分钟检测,全部跑到含有RNA的小颗粒中(即核糖体,ribosome). 第5页/共66页Crick比较了核酸和氨基酸的大小和形状后,认为不可能在空间上互补,对核酸→蛋白质的信息传递作了以下预测：1)一种分子转换器,使信息从核酸序列转换成氨基酸序列,这种分子很可能是核酸；3)不论以何种方式进入蛋白质翻译系统,都必须与模板形成氢键；4)有20种分子转换器,每种氨基酸一个；5)每种氨基酸必定有一个对应的酶,催化与特定的分子转换器结合. Crick还预言一个氨基酸对应三个核苷酸。第6页/共66页Crick预言的分子转换器(adaptor)第7页/共66页mRNA分子中每三个相临碱基组成一个密码子,代表一种氨基酸,或起始信号,或终止信号mRNA上的四种碱基可组成64个密码子,其中61个代表不同的氨基酸,其余三个代表终止信号.第8页/共66页破译密码的必备条件：要有确定的已知序列的mRNA要有同位素标记的氨基酸第9页/共66页证明三联体密码的三个著名实验的示意图第10页/共66页A、1961年,Marshall Nirenberg合成了poly(U),将它放入20根试管中,每根试管中加入了大肠杆菌细胞质抽提物和一种有同位素标记的氨基酸.反应一段时间后用TCA(三氯乙酸)将蛋白质沉淀下来,测定同位素的量,结果发现在加了同位素标记Phe的试管的沉淀物中同位素含量特别高第11页/共66页B、1964年也是由M.Nirenberg等人完成的.首先合成一个已知序列的核苷酸三聚体,然后与大肠杆菌核糖体和氨酰tRNA一起温育.由此确定与已知核苷酸三聚体结合的tRNA上连接的是那一种氨基酸.该实验对于几种密码编码同一个氨基酸提供了直接的、最好的证据第12页/共66页C、由Khorana等人完成. 利用有机化学和酶法制备了已知的核苷酸重复序列,以此多聚核苷酸作模板,在体外进行蛋白质合成,发现可生成三种重复的多肽链.若从A翻译,则合成出多聚Ile,即AUC对应Ile；若从U翻译,则合成出多聚 Ser,即UCA对应Ser；若从C翻译,则合成出多聚 His,即CAU对应 His.这是因为体外合成是无调控的合成,可以随机地从A、或U、或C翻译，所以有三种重复的多肽链生成.第13页/共66页通过Nirenberg和Khorana两位科学家的辛勤工作,于1966年全部密码都被破译.共有64个密码,其中61个密码是编码氨基酸的，其余3种是终止密码，两位科学家获得了诺贝尔奖。第14页/共66页第二位第一位 5?端第三位 3?端遗传密码表第15页/共66页遗传密码的特点1.连续性(commaless):编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读,密码间无间断、无交叉第16页/共66页2.通用性(universal)：在所有生物中都一样，但在线粒体、支原体等中有少量变化第17页/共66页3.简并性(degeneracy)除Met,Trp外,其余氨基酸均由2个以上密码子编码.同义密码子.所对应的密码子的多少与该氨基酸在生物中的利用度成比例.但每一个密码子仅对应一个氨基酸不同物种对密码子有“偏爱性”第18页/共66页4.摆动性(wobble)并不是一个tRNA对应一个密码子,一般只有三十几种tRNA来对应61个密码子,因此需有个机制让tRNA“偷懒”.这就是Crick的摆动性假说.第19页/共66页第20页/共66页开放读码框架(open reading frame, ORF)mRNA链上,从5’至3’,以AUG为起点,每三个碱基作为一个密码子连续阅读,直至出现终止密码子,AUG至终止密码子之间称为ORF第21页/共66页第二节 蛋白质的合成过程核糖体——蛋白质合成“工厂” 核糖体的基本功能:结合mRNA,在mRNA上选择适当的区域开始翻译密码子(mRNA)和反密码子(tRNA)的正确配对肽键的形成存在: 核糖体可游离存在, 真核中,也可同内质网结合,形成粗糙内质网 原核中,与mRNA形成串状——多核糖体第22页/共66页mRNA大肠杆菌核糖体的结构原核与真核生物的核糖体比较第23页/共66页原核生物翻译过程中核糖体结构模式:P