肺炎链球菌的分离和鉴定.pptVIP

肺炎链球菌 第三十页，共四十六页，2022年，8月28日 第三十一页，共四十六页，2022年，8月28日 第三十二页，共四十六页，2022年，8月28日 3. 胆汁溶菌试验 自溶酶是一种L-丙氨酸--N-乙酰胞壁酰胺酶，能切断肽聚糖上L-丙氨酸与N-乙酰胞壁酸间的连接键，从而破坏细胞壁，使菌溶解。 自溶酶在菌生长的稳定期被激活，也可被胆汁或胆盐等活性物质激活，从而促进培养物中的菌体溶解。肺炎链球菌胆汁溶菌试验为阳性，甲型溶血性链球菌的胆汁溶菌试验为阴性。 第三十三页，共四十六页，2022年，8月28日 第一页，共四十六页，2022年，8月28日 概 述 肺炎链球菌（S.pneumoniae），俗称肺炎球菌（pneumococcus）。经常寄居于正常人的鼻咽腔中，一般不致病，只形成带菌状态。当机体免疫力下降时才致病。尤其在呼吸道病毒感染后或婴幼儿、老年体弱者易发生肺炎链球菌性肺部感染。 第二页，共四十六页，2022年，8月28日 肺炎链球菌不产生外毒素，主要靠荚膜侵袭力致病。肺炎链球菌主要引起人类大叶性肺炎，肺炎后可继发胸膜炎、脓胸，也可引起中耳炎、乳突炎、副鼻窦炎、支气管炎、心内膜炎、腹膜炎、关节炎、脑膜炎和败血症等。 第三页，共四十六页，2022年，8月28日 细菌学检验不仅对疾病的病原学诊断有重要价值，同时对临床治疗的药物选择也具有十分重要意义。 第四页，共四十六页，2022年，8月28日 一、生物学性状 第五页，共四十六页，2022年，8月28日 1. 形态与染色 肺炎链球菌革兰染色呈阳性。球形或矛头状，成双排列，少呈链状。在组织中可形成荚膜（人工培养荚膜逐渐消失），无鞭毛及芽孢。 第六页，共四十六页，2022年，8月28日 第七页，共四十六页，2022年，8月28日 第八页，共四十六页，2022年，8月28日 第九页，共四十六页，2022年，8月28日 2. 培养特点 （1） 培养基 肺炎链球菌对营养要求较高，需采用质量好的哥伦比亚血液平板（ 5％马血或羊血） 。 第十页，共四十六页，2022年，8月28日 （2）分离培养 1）标本处理 及时将采集标本接种到适当的培养基上是提高分离率的前提。因为，肺炎链球菌对干燥、对寒冷的抵抗力均较弱，在标本离开机体暴露于外界复杂的环境中，其存活率十分低，不及时接种适当培养基是导致分离率低的主要原因。 第十一页，共四十六页，2022年，8月28日 2）选择性分离培养基 培养基中添加5μg/ml庆大霉素有利于肺炎链球菌的分离。 第十二页，共四十六页，2022年，8月28日 3） 培养环境 5～10％CO2、35℃培养24～48h。 第十三页，共四十六页，2022年，8月28日 （3）肺炎链球菌的菌落形态 在营养丰富的培养基上，肺炎链球菌形成扁平、中间有凹陷的典型菌落，少数菌可呈粘液型菌落。 第十四页，共四十六页，2022年，8月28日 第十五页，共四十六页，2022年，8月28日 第十六页，共四十六页，2022年，8月28日 第十七页，共四十六页，2022年，8月28日 肺炎链球菌 第十八页，共四十六页，2022年，8月28日 肺炎链球菌 第十九页，共四十六页，2022年，8月28日 第二十页，共四十六页，2022年，8月28日 肺炎链球菌 第二十一页，共四十六页，2022年，8月28日 3.抗原结构 （1）种属特异性抗原：为菌体多糖抗原，存在于肺炎链球菌的细胞壁。 （2）型特异性抗原：是存在于肺炎链球菌荚膜中的一种多糖多聚体，可溶于水，据此抗原可将肺炎链球菌分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ……等个型，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型致病性最强。 （3）菌体核蛋白抗原：存在于菌体深部，为蛋白质，无特异性。 第二十二页，共四十六页，2022年，8月28日 二、肺炎链球菌鉴定 肺炎链球菌的鉴定，主要应与甲型溶血性链球菌鉴别。其中以胆汁溶菌试验、菊糖发酵和optochin试验最为常用。必要时可作荚膜肿胀试验或小鼠毒力试验加以鉴别。在上述试验中，肺炎链球菌均应阳性，而甲型溶血性链球菌为阴性。也可用特异性单克隆乳胶或自动化仪器等相应鉴定卡作鉴定。 第二十三页，共四十六页，2022年，8月28日 肺 炎 链 球 菌 鉴 定 要 点 革 兰 阳 性 双 球 菌， 矛 头 状， 不 呈 链； 血 平 皿 菌 落 呈 草 绿 溶 血， 湿 润， 菌 落 表 面 无 小 白 点； 培 养 时 间 长 出 现 脐 窝 状； 胆汁溶解试验阳性； 荚膜肿胀试验阳性； 乳 胶 单 克 隆 抗 体 凝 集 阳 性。 第二十四页，共四十六页，2022年，8月28日 1