细胞凋亡实验.pptxVIP

细胞凋亡实验;细胞凋亡与检测方法;凋亡(apoptosis)：机体在正常生理或病理状态下发生的一种自发的、程序化的死亡过程。 坏死（Necrosis）：各种致病因子，干扰和中和了细胞的正常代谢活动，造成细胞的意外死亡。 ;二、细胞坏死与凋亡的比较;三、细胞凋亡的生理意义;;Normal Cell ;（二）、生化改变 ; 内源性核酸内切酶的作用;五、细胞凋亡的检测方法;透射电镜观察;荧光显微镜 ;2、DNA片断化检测;第14页/共28页;3、流式细胞仪检测 flow cytometer;（一） PI 单染 ;判断：在直方图上，Go/G1期前有一个亚二倍体峰。 （检测晚期凋亡，但不能判断是晚期凋亡还是坏死） ;（二）Annexinⅴ/PI双染色 ;检测标准： 早期凋亡细胞：Annexin ⅴ-FITC (+)；PI (-)； 坏死细胞和晚期凋亡继发性坏死细胞： Annexin ⅴ-FITC (+)；PI (+)； 机械性坏死及非特异性染色： Annexin ⅴ-FITC (-)；PI (+)； 正常细胞：Annexin ⅴ-FITC (-)；PI (-)； ;C-myc ASO 200 nmol/L ;4、线粒体膜势能的检测;亲脂性阳离子荧光探针JC-1以单体形式存在，可发出绿色荧光（527 nm），若以多聚体形式