免疫定性试验结果判读周育洋.pptVIP

定量分析： 确定被分析物的含量。 产生一个与待测分析物的浓度相关的光谱信号，如果有已知浓度的分析物制剂做校准，分析物的实际浓度就可以被确定。 第三十页，共八十五页，2022年，8月28日 定性分析 只关注分析物的有或无，而不关心有多少（定量）。 又分为用肉眼和经验判断结果的纯定性试验和用读数仪根据CUT OFF 值或域值判定结果的量值化定性试验。阳性结果只说明分析信号超过了分析阈值（检测限）或cut-off值（cut-off值的设定给出了简要的敏感性和特异性组合）。一般针对感染原和来自天然感染或免疫接种的相关抗体的相关检测。 第三十一页，共八十五页，2022年，8月28日 定性免疫检验方法较多，主要有沉淀试验、凝集试验、荧光免疫试验、酶免疫试验和金标法。 其中金标法虽然是灵敏、特异、快速、简便、准确率较高的体外诊断方法。但是仍存在不足之处，易出现假阳性和假阴性，尤其是国产的金标试剂，所以建议采用ELISA法。 第三十二页，共八十五页，2022年，8月28日 定性免疫检测的用途 筛选试验 用来检测全体人群或人群亚群一个特征的出现（如感染原或相关抗体的出现）。 一般要求趋向二个极端： 要么有高的临床敏感性（即超过95%的临床检出率），检测结果保证阴性筛选结果具有高可能性的没有这些特征，而阳性结果可能需要做进一步的确证试验；血站系统的传染病筛查属于此类。 要么有高的特异性，检测结果保证阳性筛选结果具有高可能性的具有这些特征。 第三十三页，共八十五页，2022年，8月28日 诊断试验 用来评价具有可疑给予特征（如一种感染 的特殊类型）的人。 敏感性和特异性应该处于相对平衡状态。如果此特征对治疗或预后考虑很重要，那么敏感性要尽可能的高； 而且后续已有准确的确证试验，可以不需要高的特异性。 感染性疾病的大多数临床试验是用于诊断。 第三十四页，共八十五页，2022年，8月28日 确证试验 获得筛选或诊断试验阳性结果后，增加的试验用于证明和确认此人前面的阳性结果。在这种情况下，主要考虑的性能常常是特异性和阳性预测值，而不是敏感性和阴性预测值；特异性应该超过98到99%。 确证试验可以是非免疫化学的（如，培养或脱氧核糖核酸研究）或免疫化学的（包括免疫印迹和抗原或抗体中和试验）。 如果筛选和诊断试验已具有高的特异性和阳性预测值，则不需要确证试验。 第三十五页，共八十五页，2022年，8月28日 定性免疫检验质量控制 第三十六页，共八十五页，2022年，8月28日 已知的弱阳性质控:每次测定都应至少带一个已知的弱阳性对照，从而有助于判断临床标本的检测结果是否有效。 阴性质控:必需 每次测定都必须设空白对照、阴性对照、阳性对照和弱阳性对照。 第三十七页，共八十五页，2022年，8月28日 CUT OFF 值的选择 一个试验一般不可能有完全的（100%）敏感性、特异性或预测值。Cut off值的选择和来自一个检测的结果报告，应该考虑以下这些性能指标哪个更重要： （1）当疾病是严重并且可治疗的，应该不能漏检；假阳性结果不会导致严重的精神或经济创伤；不合适的治疗仅有轻微的后果需要高敏感性。 （2）当疾病是严重的但是不能治疗；没有疾病时具有心理或公众健康价值；假阳性结果可能引起严重的精神或经济上的创伤（如HIV抗体的确证试验）需要高特异性。 第三十八页，共八十五页，2022年，8月28日 （3）当不合适的治疗可能导致严重后果，需要高预测值。 （4）当疾病严重但是可治疗，并且假阴性或假阳性结果同样严重（如引起脑膜炎细菌抗原的分析）需要高符合率。 在确定这些因素的合适平衡点时，厂商或其它检测的研发者应该用来自三种人群的样本评估检测的性能：感染疾病的人，没有疾病的健康人和非讨论疾病患者的病人。厂商应该标明推荐的cut-off值是怎么定义的以及在什么样的人群应用。 理想状态，实验室应该在自己的服务人群中确定区间和cut-off值。 第三十九页，共八十五页，2022年，8月28日 纯定性试验的质控要求 临床免疫纯定性试验大都属于CLIA’88豁免的技术（waived testing sites），包括免疫沉淀、凝集试验、标记免疫的金标试纸和斑点渗滤、免疫荧光印迹法等等。 对于FDA等批准家庭使用的技术，只要求检测装置有内对照，检测结果满足说明书规定即可； 对于需要经验来判定结果的技术仍需在实验室进行，均有质控的要求，但国际上无具体操作的规定和资料。 第四十页，共八十五页，2022年，8月28日 根据显色或发光直