农业农村部公告第323号-26-2020CN.docx

ICS 65.020.01 B 04 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第323号—26—2020 转基因生物及其产品食用安全检测 外源蛋白质大鼠28 d经口毒性试验 Food safety detection of genetically modified organisms and derived products—28-day oral toxicity test of foreign proteins in rats 2020-08-04 发布 2020-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 农业农村部公告第323号—26—2020 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国农业农村部提出， 本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口， 本标准起草单位：农业农村部科技发展中心、中国农业大学、天津市疾病预防控制中心。 本标准主要起草人：黄昆仑、李夏莹、钱智勇、张秀杰、贺晓云、车会莲、许文涛、罗云波。 农业农村部公告第323号—26—2020 转基因生物及其产品食用安全检测 外源蛋白质大鼠28 d 经口毒性试验 1 范围 本标准规定了转基因生物外源蛋白质28d 经口毒性试验的基本试验方法、数据处理和结果判定。 本标准适用于评价转基因生物外源蛋白质的重复经口暴露毒性作用。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB14922.2 实验动物 微生物学等级及监测 GB 14924.3 实验动物 配合饲料营养成分 GB 14925 实验动物环境及设施 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 28 d经口毒性 28-day oral toxicity 实验动物连续28 d 经口给予受试物后引起的健康损害效应。 3.2 未观察到有害作用剂量 no observed adverse effect level, NOAEL 通过动物试验，以现有的技术手段和检测指标未观察到与受试物有关的毒性作用的最大暴露剂量。 3.3 最小观察到有害作用剂量 lowest observed adverse effect level, LOAEL 在规定的条件下，受试物引起实验动物组织形态、功能、生长发育等有害效应的最小作用剂量。 3.4 靶器官 target organ 受试物直接发挥毒作用的器官或组织。 3.5 外源蛋白质 foreign protein 从转基因生物中提取的通过基因工程技术转入生物中的外源基因所表达的蛋白质产物，或者将转基 因植物中的外源基因转入微生物中所表达的与植物中的外源蛋白质具有实质等同性的蛋白质产物。 3.6 对照蛋白质 control protein 与受试蛋白质等同或同源的天然来源的蛋白质，具有高度同源的氨基酸序列及相似的生物学功能。 4 原理 确定在28 d 内连续经口给予外源蛋白质后引起的毒性效应，了解外源蛋白质毒性效应的剂量-反应 关系和靶器官，确定28d 经口最小观察到有害作用剂量(LOAEL) 或未观察到有害作用剂量(NOAEL), 初步判断受试蛋白质经口暴露的毒性及作用特点。 工 2 农业农村部公告第323号—26—2020 5 试剂 5.1 主要试剂 甲醛、二甲苯、乙醇、苏木素、伊红、石蜡、血球分析仪稀释剂、生化分析试剂、凝血分析试剂、尿液分析 试剂等。 5.2 溶媒 根据外源蛋白质的特点可以选择水、羧甲基纤维素等溶媒。如果选用其他溶媒，需说明理由、 6 主要仪器 电子天平、代谢笼、生物显微镜、检眼镜、生化分析仪、血细胞分析仪、血凝分析仪、尿液分析仪、离心 机、石蜡切片机等。 7 实验动物 7.1 动物选择 实验动物的选择应符合GB14922.2 的有关规定，选用雌、雄两种性别的大鼠，4周龄～6周龄。试验 开始时，每个性别动物体重差异不超过平均体重的土20%。 7.2 动物准备 试验开始前，在实验动物房给予常规基础饲料喂养3d～5d, 以适应环境并进行检疫观察。 7.3 动物饲养 7.3.1 实验动物饲养条件应符合GB14925 的要求，饮用水应符合GB 5749 的要求，饲料应符合GB 14924.3的要求。试验期间，动物自由饮水和摄食。 7.3.2根据实验动物的空间要求确定每笼动物只数，每笼动物数一般不超过2只。 7.3.3 试验期间每组动物非试验因素死亡率应小于10%,濒死动物