农业农村部公告第316号-2-2020CN.docx

ICS 65.120 B 46 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第316号一2-2020 代替NY/T 910—2004 饲料中盐酸氯苯胍的测定 高效液相色谱法 Determination of robenidine hydrochloride in feeds— High performance liquid chromatography 2020-07-17发布 2020-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 I 农业农村部公告第316号—2—2020 前 言 本标准按照 GB/T1.1—2009 给出的规则起草。 本标准代替NY/T 910—2004《饲料中盐酸氯苯胍的测定 高效液相色谱法》。与NY/T 910—2004 相比，除编辑性修改外主要技术变化如下： ——增加了精料补充料(见1) 将最低检测浓度修改为检出限和定量限(见1,2004年版的1) 修改了提取方法(见7.1,2004年版的7.1); 曾加了净化处理方法(见7.2) 修改了液相色谱的流动相(见7.3,2004年版的7.3): 增加了单点校准公式(见8); 则除了再现性规定(2004年版的9.2); 增加了附录(见附录 A)。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出， 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76) 归口。 本标准起草单位：山东省饲料质量检验所。 本标准主要起草人：张芸、孙延军、李桂华、刘华阳、李会荣、李俊玲、杨智国、郭玉秋、刘婕、王英英。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： ——NY/T 910—2004。 1 农业农村部公告第316号—2—2020 饲料中盐酸氯苯胍的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了饲料中盐酸氯苯胍的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中盐酸氯苯胍的测定。 本标准在配合饲料、浓缩饲料和精料补充料中盐酸氯苯胍的检出限为0.5 mg/kg,定量限为1.0mg/kg; 添加剂预混合饲料中盐酸氯苯胍的检出限为1.0 mg/kg, 定量限为2.0 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 试样中的盐酸氯苯胍经提取，用阳离子交换固相萃取柱净化后，高效液相色谱仪测定，外标法定量。 4 试剂或材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯。 4.1 水：GB/T 6682,一级。 4.2 甲醇：色谱纯。 4.3 三乙醇胺。 4.4 提取液：将70 mL 乙腈与30 mL 水混合，然后加入0.2 mL 甲酸，混匀。 4.5 2%甲酸溶液：2mL 甲酸加水稀释至100mL, 混匀。 4.6 5%氨化甲醇溶液：5mL 氨水用甲醇稀释至100 mL, 混匀。 4.7 标准储备溶液(1mg/mL): 称取盐酸氯苯胍对照品(CAS 号：25875-50-7,纯度不低于99.5%)10 mg (精确至0.01mg) 于10mL 棕色容量瓶中，用甲醇(4.2)溶解定容。2℃~8℃保存，有效期为3个月。 4.8 标准中间溶液(100μg/mL): 准确移取标准储备液溶(4.7)1mL 于10 mL 棕色容量瓶中，用甲醇 (4.2)稀释定容。2℃~8℃保存，有效期为1个月。 4.9 标准系列工作溶液：准确移取适量标准中间溶液(4.8)于10 mL 棕色容量瓶中，用甲醇(4.2)稀释定 容配成标准系列溶液，浓度分别为0.10μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00μg/mL、2.00 μg/mL、 5.00μg/mL、10.0μg/mL。 临用现配。 4.10 固相萃取柱：混合型阳离子交换柱，60 mg/3mL; 或性能相当者。 4.11 微孔滤膜：0.45 μm, 有机相。 5 仪器设备 5.1 高效液相色谱仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。 5.2 分析天平：感量0.0001 g 和0.00001 g。 5.3 涡旋混合器。 5.4 离心机：转速不低于5000 r/min。 2 农业农村部公告第316号—2-2020 5.5 固相萃取装置。 5.6 氮吹仪。 6 样品 按GB/T 20195 制备样品，至少200g, 粉碎使其全部通过0.42 mm 孔径的分析筛，充分混匀，装入磨 口瓶中，避光保存，备用。选取类型