农业农村部公告第316号-6-2020CN.docx

ICS 65.120 B 46 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 农业农村部公告第316号—6—2020 饲料中乙氧酰胺苯甲酯的测定 高效液相色谱法 Determination of ethopabate in feeds — High performance liquid chromatography 2020-07-17发布 2020-11-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 农业农村部公告第316号—6—2020 前 言 本标准按照 GB/T1.1—2009 给出的规则起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由农业农村部畜牧兽医局提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)归口。 本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心 (北京)]。 本标准主要起草人：宋荣、索德成、李丽蓓、范理、杨文军、符金华。 工 1 农业农村部公告第316号—6—2020 饲料中乙氧酰胺苯甲酯的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了饲料中乙氧酰胺苯甲酯的高效液相色谱测定方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中乙氧酰胺苯甲酯的测定。 本标准的检出限为0.2 mg/kg, 定量限为0.3 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 原理 试样润湿后用乙腈提取，经 QuEChERS 和中性氧化铝固相萃取柱净化，用高效液相色谱分离，荧光 检测，外标法定量。 4 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 4.1 水：GB/T 6682,一级。 4.2 甲醇：色谱纯。 4.3 正己烷：色谱纯。 4.4 丙酮：色谱纯。 4.5 乙腈。 4.6 乙腈：色谱纯。 4.7 QuEChERS 盐析剂：按4 g 无水硫酸镁、1 g 氯化钠比例配制，并混合均匀。 4.8 QuEChERS净化剂：按0.5g 无水硫酸镁、0.8 g 乙二胺-N-丙基吸附剂(PSA, 粒径40 pm)、0.6 g 十八烷基键合硅胶吸附剂(Ci?,粒径40μm) 比例配制，并混合均匀。 4.9 试样溶解液：正己烷(4.3)+丙酮(4.4)=95+5,将950mL 正已烷加入50 mL 丙酮中。 4.10 乙腈水溶液：乙腈(4.6)+水=3+7,将300 mL 乙腈加入700mL 水中。 4.11 乙氧酰胺苯甲酯(Ethopabate,CAS 号：59-06-3):纯度≥99.5%。 4.12 乙氧酰胺苯甲酯标准储备溶液(100μg/mL): 称取10mg 乙氧酰胺苯甲酯(精确至0.00001 g) 于 100mL 棕色容量瓶中，用甲醇(4.2)溶解定容。于2℃~8℃下保存，有效期为2个月。 4.13 乙氧酰胺苯甲酯标准系列工作溶液：分别准确量取0.05 mL、0.25 mL、0.50 mL、2.50 mL、 5.00 mL、10.0mL乙氧酰胺苯甲酯标准储备溶液(4.12)于50 mL 棕色容量瓶，用甲醇(4.2)稀释定容， 配成标准系列工作溶液，浓度分别为0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0 μg/mL、5.0μg/mL、10.0 μg/mL、 20.0μg/mL。 临用现配。 4.14 固相萃取柱：中性氧化铝，1000 mg/6mL, 或性能相当者。 4.15 微孔滤膜：0.45μm, 有机系。 2 农业农村部公告第316号—6—2020 5 仪器设备 5.1 高效液相色谱仪：配有荧光检测器。 5.2 分析天平：感量0.0001g 和0.00001 g。 5.3 超声波清洗器. 5.4 涡旋混合器. 5.5 离心机：转速不低于10000 r/min。 5.6 固相萃取装置。 5.7 氮吹仪：带加热装置，温度可控制在(50±2)℃。 6 样品 按GB/T 20195制备样品，至少200g,粉碎使其全部通过0.42 mm 孔径的分析筛，充分混匀，装入磨 口瓶中，备用。 7 试验步骤 7.1 提取 平行做2份试验。称取配合饲料、浓缩饲料或精料补充料2g～3g, 添加剂预混合饲料0.5 g ～1g, 精确至0.0001g,置于50mL 离心管中，加等量水润湿样品(配合饲料、浓缩饲料或精料补充料加2mL~ 3mL 水，添加剂预混合饲料加0.5 mL～1