NY_T 3860-2021CN 芹菜抗根结线虫鉴定技术规程.docx

ICS CCS 65.020.01 B 05 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3860-2021 芹菜抗根结线虫鉴定技术规程 Technical code of practice for identification of celery resistance against root-knot nematode(Meloidogyne spp.) 2021-05-07 发布 2021-11-01 实施 中华人民共和国农业农村部发布 I NY/T 3860—2021 前 言 本文件按照 GB/T1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：中国农业科学院蔬菜花卉研究所、恩施土家族苗族自治州农业科学院、苏州市食品 检验检测中心。 本文件主要起草人：茆振川、杨宇红、殷红清、徐东辉、谢丙炎、凌键、李彦、赵建龙、张雅涵。 NY/T 3860—202 芹菜抗根结线虫鉴定技术规程 1 范围 本文件确定了芹菜抗根结线虫鉴定相关的术语和定义，并规定了芹菜抗根结线虫的鉴定方法和抗性 评估方法。 本文件适用于芹菜(Apium gravolens L..)品种、资源材料对根结线虫(Meloidogyne spp.)(见附录 A)的抗性鉴定。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 NY/T 1858.8 番茄抗南方根结线虫病鉴定技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 芹菜根结线虫病 celery root-knot nematode disease 由根结线虫(Meloidogyne spp.)侵染芹菜根系而引起的一种线虫病害。 3.2 抗病性 disease resistance 植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。 3.3 人工接种 artificial inoculation 在适宜条件下，通过人工操作将接种体置于植物体适当部位并使之发病。 3.4 接种体 inoculum 用于接种以引起病害的病原物或病原物的一部分。 3.5 病情级别 disease rating scale 人为定量植物个体或群体发病程度的数值化描述。 3.6 病情指数 disease index(DI) 通过对植物个体发病程度(病情级别)数值的计算所获得的群体发病程度的数值化描述。 4 抗性鉴定 4.1 芹菜育苗 将草炭、蛭石和细砂按体积2:1:1混合均匀，121℃湿热灭菌2 h.作为育苗基质。芹菜种子用 0.5%次氯酸钠消毒1 min～2 min,用灭菌水冲洗3次，在17℃下避光催芽，当种子露白时播种，在温度 20℃、湿度70%～80%条件下育苗。芹菜苗2叶～3叶期移栽到直径10 cm 的苗钵。 2 NY/T 3860—2021 4.2 接种体分离、保存及制备 4.2.1 接种体分离 采集感染根结线虫的病株，直接挑取根结上的卵块，单卵块接种在感病寄主植物根际土壤中，在 25℃~28℃、土壤相对湿度70%～80%条件下培养40d～60d, 收集在根系上的卵块，确定分离成功。 4.2.2 接种体繁殖及保存 将根结线虫卵块接种在高感寄主植物的根部，在25℃~28℃、土壤相对湿度70%～80%条件下培 养，并且每60 d 进行一次线虫分离、接种，对根结线虫进行扩繁及保存。 4.2.3 接种体制备 将根结线虫卵块用0.5%次氯酸钠消毒1min～2min, 然后用灭菌水冲洗3次，卵块转移至100目标 准筛网上，放入培养皿内，加入大约10 mL 灭菌水，使卵块与水面接触。在25℃~28℃下避光孵化2d~ 3d, 收集二龄幼虫，制备每毫升1000条的线虫悬浮液用于接种鉴定。 4.3 接种时期 芹菜苗4叶～5叶期接种。 4.4 接种数量 每株接种根结线虫二龄幼虫1500条。 4.5 接种方法 接种时，在距芹菜苗主根2.0cm 周围，在三个不同方向各打1个小孔，深度为1cm, 分别接种0.5 mL 线虫悬浮液，并轻压封闭孔口，合计接种线虫1500条/株。每份鉴定材料接种10株苗，重复3次。 4.6 感病对照 选择病情指数大于60的芹菜品种作为感病对照，建议可以选择荷兰巨芹、天津实心芹等品种。 4.7 接种后管理 植株在温度25℃左右、相对湿度70%～80%,自然光照条件下，按照正常生产条件进行管理。 4.8 病情调查 4.8.1 调查时间 接种后40d 左右