NY_T 3867-2021CN 粮油作物产品中黄曲霉毒素B1、环匹阿尼酸毒索、杂色曲霉毒素的快速检测....docx

ICS CCS 65.020.01 B 04 NY 中 华 人 民 共 和 国 农 业 行 业 标 准 NY/T 3867-2021 粮油作物产品中黄曲霉毒素B?、环匹 阿尼酸毒素、杂色曲霉毒素的快速 检测 胶体金法 Rapid detection of aflatoxin Bi, cyclopiazonic acid, and sterigmatocystin in products of cereals and oil crops by colloid gold method 2021-05-07 发布 2021-11-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 1 NY/T 3867—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1 2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 本文件起草单位：中国农业科学院油料作物研究所、农业农村部生物毒素检测重点实验室、农业农村 部油料产品质量安全风险评估实验室(武汉)、国家农业检测基准实验室(生物毒素)。 本文件主要起草人：张奇、唐晓倩、李慧、王督、李培武。 1 NY/T 3867—2021 粮油作物产品中黄曲霉毒素 B、 环匹阿尼酸毒素、 杂色曲霉毒素的快速检测 胶体金法 1 范围 本文件规定了粮油作物产品中黄曲霉毒素 B、环匹阿尼酸毒素和杂色曲霉毒素快速检测的胶体 金法。 本文件适用于花生、大米、玉米、小麦、大豆五种粮油作物产品中黄曲霉毒素 B1、环匹阿尼酸毒素、杂 色曲霉毒素的快速筛查。其他粮油作物产品可参考。 本方法检出限：黄曲霉毒素 B?1.0μg/kg, 环匹阿尼酸毒素50.0μg/kg,杂色曲霉毒素200.0 μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文 件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样中黄曲霉毒素 B、环匹阿尼酸毒素、杂色曲霉毒素与胶体金标记的特异性单克隆抗体发生结合 后，抑制了流动过程中抗体与硝酸纤维素膜检测线上黄曲霉毒素 B?-BSA 偶联物、环匹阿尼酸毒素-BSA 偶联物、杂色曲霉毒素-BSA 偶联物的免疫反应，使检测线颜色变浅，通过检测颜色变化进行测定试样中毒 素的含量水平。 5 试剂 除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。 5.1 水，符合GB/T 6682中规定的二级用水。 5.2 乙腈(CH?CN)。 5.3 蔗糖(C?H?2O)。 5.4 牛血清白蛋白(BSA), 纯度大于98%。 5.5 吐温-20(Cs?Hn?O? s)。 5.6 氯化钠(NaCl)。 5.7 黄曲霉毒素 B(CAS 号：1162-65-8),纯度大于98%。 5.8 环匹阿尼酸毒素(CAS 号：18172-33-3),纯度大于98%。 5.9 杂色曲霉毒素(CAS 号：163391-76-2),纯度大于98%。 5.10 70%乙腈溶液：取70mL 乙腈(5.2)和30mL 水(5.1),混匀。 5.11 试样稀释液：称取1.0g 蔗糖(5.3)、0.5g 牛血清白蛋白(5.4)和2.5g 吐温-20(5.5),用水(5.1)溶 解定容至100.0 mL, 现用现配。 5.12 黄曲霉毒素B?、环匹阿尼酸毒素、杂色曲霉毒素标准样品储备溶液：分别称取标准品黄曲霉毒素B? (5.7)、环匹阿尼酸毒素(5.8)、杂色曲霉毒素(5.9)各1.0 mg (精确至0.01 mg),用乙腈(5.2)溶解定容至 2 NY/T 3867—2021 10.0mL。 此标准溶液浓度为0.10 mg/mL,-20℃ 保存，备用。 5.13 胶体金标记抗体复合物：黄曲霉毒素B?、环匹阿尼酸毒素、杂色曲霉毒素单克隆抗体的纯度不低于 80%,亲和力常数不低于1.00×10 °L/mol、与其他毒素交叉反应率小于10%。 6 仪器设备 6.1 胶体金多通道检测仪，信号值变异系数CV≤3.0%。 6.2 免疫层析检测试纸条：固定有黄曲霉毒素 B,-BSA 偶联物、环匹阿尼酸毒素-BSA 偶联物、杂色曲霉 毒素 BSA 偶联物，用于样品中黄曲霉毒素 B、环匹阿尼酸毒素、杂色曲霉毒素与胶体金标记抗体预反应 后再与偶联物反应的载体。 6.3 均质机。 6.4 分析天平：感量0.01 mg 、1mg 和0.01g。 6.5 恒温装置：(37.0±2.0)℃。 6.6 涡旋混合器：≥2000 r/min。 6.7 微量移液器：10μL～100pL,