未知病原菌的分离鉴定.pptxVIP

未知病原菌的分离鉴定;未知病原菌的分离鉴定 ;病原菌检测程序;临床标本中未知病原性球菌的分离鉴定程序 ;查病原;伊红美蓝平板--- EMB;克氏双糖铁试验;枸橼酸盐利用试验;吲哚试验;玻片凝集;一、材料： 5人/组 1.待检标本： 脓拭子、咽拭子、尿液标本、肛拭子1#、肛拭子2# 2.培养基：血平板 3块/组 EMB平板 3块/组 克氏双糖铁斜面 3支/组 动力-靛基质-尿素半固体 3支/组 3.其他：革兰染液、玻片、10%胆盐、靛基质试剂、NS、兔血浆、 3%H2O2、沙门氏菌多价血清、志贺氏菌多价血清 二、方法 (实验程序) 三、结果 四、讨论;实验目的 熟悉临床标本中常见病原菌的分离鉴定程序 学习脓汁、痰、粪便、尿液等临床标本的检查方法 实验要求 针对病例，对临床标本中的病原菌进行分离和鉴定 实验前制定方案，实验后写出实验报告 ;实验材料;;实验操作与观察;实验操作与结果;实验材料;;实验操作;胆汁溶菌实验（平板法）： 在血平板上标记单个菌落 直接在菌落上加一接种环去氧胆酸纳溶液 将平板37℃孵育20～30分钟，观察结果;荚膜染色：石炭酸复红单染 1.涂片、自然干燥、火焰固定； 2.1滴石炭酸复红，立即冲去，镜下观察。 ;实验材料;;实验材料;;讨论内容;;肥达试验 (Widal test) 用已知的伤寒沙门菌O、H抗原 、甲型副伤寒沙门菌、肖氏、希 氏沙门菌H抗原的诊断菌液，与 患者血清作定量凝集试验，检测 患者血清中的相应抗体，辅助诊 断伤寒、副伤寒。;Widal test;Widal test (5人/组); 弃0.5ml于消毒缸 1 2 3 4 5 6 NS 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5ml 未知血清(1:10) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 菌液(摇匀) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5ml (4种,1种/人) 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 (阴性对照) 37℃，水浴过夜（完成一个完整的检验）; TO TH TAH TBH TCH 意义 1:640 ?? ? ???? ? ??? ? ? ? ? ? ???  ?? ? ? 1:320 ??? ? ??? ? ? ? ? 1:640 1:320 ? ? ?  1:640 ? ? ??? 1:160 ? ? ??  ? 1:640 ? ? ? ? 1:160 ? ? ??? ? ? ?? ? ?;“O”抗原凝集现象：（呈颗粒状薄膜） 100％凝集：“＋＋＋＋”： 上层清亮，底部完全凝集，呈颗粒状薄膜（有卷边）。 75％凝集：“＋＋＋”： 上层不太清亮，底部凝集明显。 50％凝集：“＋＋”： 上层混浊，下层凝集。孔底中央中间约 50％白色沉淀，周围膜状凝集，约50％。 25％凝集：“＋”：液体比较混浊，膜状凝集少。 0％凝集：“－”：如第6孔，混悬后，混浊均匀，底部无凝集。;“H”抗原凝集现象：（呈絮状凝集） 100％凝集：“＋＋＋＋”：液体清亮，底部中央完全凝集，呈蓬松絮状；混悬起来，液体仍然清亮，分散开的絮状凝集块漂浮于液体中。 75％凝集：“＋＋＋”：上层不太清亮，底部絮状凝集明显。 50％凝集：“＋＋”：混悬后，上层均匀混浊，下层絮状凝集约50％。 25％凝集：“＋”：混悬后，液体比较混浊，絮状凝集少。 0％凝集：“－”：如第6孔，混悬后，液体均匀混浊，底部无凝集。;谢谢观看！