课题 血红蛋白的提取和分离.pptxVIP

课题 血红蛋白的提取和分离;提问; 根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附的性质、对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。;课题3 血红蛋白的提取和分离;教学目标;过程与方法;教学重难点;内容解析;思考：说出说出几种常见的缓冲对;弱酸及其对应的盐：; 缓冲溶液通常由1~2种缓冲剂溶解于水中配制而成。 调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同PH范围内使用的缓冲液。;凝胶色谱法;凝胶色谱法的原理;电泳;视频：;试验设计;1.样品处理;1.1 红细胞的洗涤： 离心将血液分层 用胶头吸管吸出黄色血浆 用生理盐水洗涤。;1.3 分离血红蛋白溶液： 离心分层；滤纸过滤去除脂溶性沉淀层；分液漏斗分出红色透明液体。;1.4 透析： 装入透析袋并置于磷酸缓冲液中（PH为7.0）透析。;2.凝胶色谱操作;2.2 凝胶色谱柱的装填;2.3 样品的加样和洗脱;E、收集 待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每5ml收集一试管，连续收集。;;1.洗涤次数过少，未能除去血浆蛋白。;2.凝胶色谱柱装填;相关链接; 不同的光线透过皮肤的方式不同：蓝光在皮肤表面被反射回来；红光透射得比较深；静脉中深色的血吸收大部分红光。所以我们看到的是皮肤表面反射的蓝光 。;课堂小结;带电粒子在电场作用下发生迁移的过程。;2.凝胶色谱操作;高考链接;解析： 题干中给予“细胞分化是奢侈基因选择性表达的结果”，根据题干可知，找出分化的细胞中特殊成分的基因即可，四个选项中BCD是所有活细胞中都具体的基因，而A.血红蛋白基因是分化后的红细胞才表达的基因。; 2.2003全国卷Ⅰ·理综 能与人体血液中血红蛋白结合的一种有毒气体是( ) A.氯气 B.氮气 C.一氧化碳 D.甲烷 ;课堂练习;选择题;2. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，关于蛋白质的叙述，正确的是（ ） A. 相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质 B. 相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质 C. 相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较??的蛋白质 D. 二者根本无法比较;简答题;2. 蛋白质的分离和提取的原理是什么？;教材习题答案; 相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快； 相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。 因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，这种现象又叫分子筛现象。;;　　缓冲溶液的作用是维持反应体系的pH不变。在生物体内进行的各种生物化学过程都是在精确的pH 下进行的受到氢离子浓度的严格调控。 为了在实验室条件下精确的模拟生物体内的天然环境，就必须保持体外生物化学反应过程有与体内过程完全相同的PH。;3.电泳及其原理是什么？;4.你能描述血红蛋白分离的完整过程吗？; 5. 与其它真核细胞相比，红细胞有什么特点？这一特点对你进行蛋白质的分离有什么意义？;再见;感谢观看！