昆虫细胞的培养综述.pdfVIP

昆虫细胞培养及其应用进展 摘 要：随着生命科学的迅速发展，细胞工程愈来愈受到人们的重 视。以 ， 昆虫细胞为对象的细胞培养技术在现代实验生物学上具有重要 的价值 已 经广泛地应用于医学、农业及生物学的各个领域。本文综 述了有关昆虫细 ， 胞培养的研究进展 包括昆虫细胞培养基研究开发： 昆虫细胞系的建立和 组织培养，利用生物反应器大规模培养昆虫细 胞，昆虫细胞 2 杆状病毒 表达系统，构建基因工程细胞系及其稳定性 表达，以及昆虫细胞培养的 应用前景和研究展望。 关键词：昆虫细胞系；昆虫细胞培养；基因表达；培养条件 昆虫的组织培养最早始于 1915 年，直到 1962 年 Grace 才成 ， ， 功建立了世界上第一个细胞系 此后昆虫细胞培养在世界范围内广 泛开展 不断有新细胞系建立的报道。现在，昆虫细胞培养已在细胞 生物学、分子 生物学、昆虫学、病毒学、生物化学、遗传学等领域的 研究工作中发挥着 重要的作用。 1 昆虫细胞培养基 昆虫细胞培养基的发展经历了天然培养基、合成培养基和无血清 培养 基三个阶段.天然培养基采用取自动物体液或从组织中提取的 成分作为培 养液.合成培养基最大的特点是各种成分已知 •无血清培 养基是在已知细胞所需营养物质和贴壁因子基础上 ，在基础培养基 ， 中加入适宜的促细胞生长因子 能够保证细胞生长良好无须补加血 清的培 养基.昆虫细胞培养基的发展主要是合成培养基的发展 .[1] 体外培养昆虫组织的首创者是 R ichard Ben 2dict (1915),但他当 时没有合适的昆虫细胞培养基。T rager 首次研究了培养基中昆虫细 胞的 生长条件，目的是证明单个细胞能在体外存活几天，并利用昆虫 细胞培 养基研究昆虫和哺乳动物病毒。1956 年 Silver W yatt 改进了 用于家蚕 （B om byx m ori L innaeus ）蛹的培养基，成功地使细胞存活 了 14d。他的 培养基含有浓度与家蚕血淋巴成分相应的 21 种氨基 ， 酸、5 种盐、3 种有机酸、以及果糖、海藻糖和葡萄糖 并相应调解 了pH 值和渗透压，这为昆虫细胞培养基的研究奠定了重要的基础。 1956 年就在 W yatt 发表论文时，Grace 在 W yatt 的培养液中增加了 胆 固醇、内分泌腺和卵巢组织的提取物以及含有 10 种 B 族维生素 的混合物， 使 4 龄家蚕幼虫的卵巢细胞存活了 29d 。从此，昆虫细胞 培养基的研究 便迅速发展起来。到目前为止，至少已报道了 60 多种 昆虫细胞培养基。 许多昆虫培养基配方正不断得到改进 ，以使之适于 细胞生长。最通用的 商品培养基 Grace 氏培养基、TC2100 、IPL 241、 TNM 2FH 以及经改良 的哺乳动物细胞培养基 TC1992M K 等。 TC2100 适合于苜蓿丫纹夜蛾核型多角体病毒在草地贪夜蛾细胞系 （Sf9 细胞系）中生长，但它仅适用于实验室而不适用于大规模培养 ， IPL 241 提高了昆虫细胞系的生产规模，利于杆状病毒的有效生产。 这些培养基是呈液体或粉剂的商品 ，使用时通常补充 5%〜10% FB