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动物细胞工、单克隆抗体.pptVIP

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单克隆抗体 筛选二 杂交细胞 杂交瘤细胞 体外或 体内培养 筛选一 骨髓瘤 细胞 诱导融合 分泌特异抗体 的杂交瘤细胞 杂交瘤细胞群 提取 已免疫的 B淋巴细胞 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 单克隆抗体的制备 既能大量繁殖 又能产生专一抗体 特异性强 灵敏度高 可大量制备 课堂 小结 注射 抗原 当前第25页\共有37页\编于星期五\18点 2.3单克隆抗体的应用 诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 单克隆抗体最主要的优点:特异性强,灵敏度高,并能大量制备。 当前第26页\共有37页\编于星期五\18点 * * * * * * * 当前第1页\共有37页\编于星期五\18点 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 温故知新: 植物体细胞杂交过程 当前第2页\共有37页\编于星期五\18点 材料1: 1970年,有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验,以证明细胞膜的流动性。那么,如何实现人—鼠细胞的融合,动物细胞融合后还有什么用途呢? 人-鼠(想像图) 当前第3页\共有37页\编于星期五\18点 A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合(也称细胞杂交):是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 一、动物细胞融合 当前第4页\共有37页\编于星期五\18点 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂,形成完整的杂交细胞 诱导的手段? 融合后细胞的类型? AB杂种细胞遗传物质 有什么特点? 三种AA、AB、BB(A、B) 含两种生物的遗传物质 1.2动物细胞融合过程 原理? 当前第5页\共有37页\编于星期五\18点 1.2动物细胞融合过程 为什么灭活的病毒灭活病毒诱导细胞融合的原理:能作诱导剂? 灭活丧失感染性 保留融合活性 当前第6页\共有37页\编于星期五\18点 灭活病毒诱导细胞融合的原理: 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏这些病原体的抗原结构。 P52生物技术资料卡 当前第7页\共有37页\编于星期五\18点 1.3动物细胞融合技术的意义和应用 当前第8页\共有37页\编于星期五\18点 植物细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 融合前处理 使用的酶 诱导方法 主要用途 细胞膜的流动性细胞的全能性 细胞膜的流动性 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 物理方法 (离心、振荡、电激) 化学方法(PEG) 物理、 化学方法(PEG) 灭活的病毒 获得杂种植株 制备单克隆抗体 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 当前第9页\共有37页\编于星期五\18点 有梦想,才会有创造! 已成功的动物细胞融合实例有很多,如人—小鼠、人—兔、人—鸡、鼠—兔、鸡—鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌—鸡 、人—胡萝卜 等细胞的融合。 生物种间杂交想像图 当前第10页\共有37页\编于星期五\18点 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( ) A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点( ) 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是( ) A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 B B 初试牛刀 A 当前第11页\共有37页\编于星期五\18点 强调:效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞,下文将其简称为B淋巴细胞 抗体:能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 能产生抗体的细胞是浆细胞(即效应B细胞)。 温故知新 二、单克隆抗体 B淋巴细胞 效应B淋巴细胞 记忆B淋巴细胞 分化 当前第12页\共有37页\编于星期五\18点 抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体 该法制备抗体的缺点: 产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。 如何解决这个问题呢? 单克隆抗体! 当前第13页\共有37页\编于星期五\18点 读下面一段资料,找出单克隆抗体的概念 人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以

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