蛋白质和维生素的测定选用.pptVIP

二、水溶性维生素的测定 （二） 2，4-二硝基苯肼法 1、原理 还原型抗坏血酸 脱氢型抗坏血酸 氧化 二酮古乐糖酸 氧化 二酮古乐糖酸 2，4-二硝基苯肼 ＋ 脎 520nm比色 当前第30页\共有54页\编于星期六\10点 二、水溶性维生素的测定 2、试剂 4.5mol/L硫酸 （9+1）硫酸 2% 2，4-二硝基苯肼 2%草酸 抗坏血酸标准溶液1mg/ml 2%硫尿 1%硫尿 1mol/ml盐酸 1%草酸 活性炭 当前第31页\共有54页\编于星期六\10点 二、水溶性维生素的测定 3、测定步骤 样品的制备 显色 硫酸处理 比色 氧化 称一定样（100g)鲜样 → 加等量1%草酸 → 于高速捣碎机捣碎 → 取匀浆1—40g → 用1%草酸定容100ml → 过滤→滤液待用 取滤液25ml → 加2g活性炭 → 摇1分钟 → 静置过滤 → 弃去初滤液，取滤液10ml→ 加入2%硫脲溶液 →混匀 →得样品氧化液 取上述氧化液各4ml于三支试管中→向其中两支管加入2%2，4-二硝基苯肼1.0ml,另一管作空白 → 将三支管加盖 → 于37℃保温箱3小时 → 取出后样品管放入冰水中 → 样品空白管取出后冷至室温 → 在样品空白管加入2，4-二硝基苯肼 1ml →置于室温下放置10-15min →样品管和空白管都于冰浴中 向上述已放入冰水中的三支试管各加入（