蛋白质的通性纯化和表征.pptxVIP

蛋白质的通性纯化和表征;一、蛋白质的酸碱性质 二、蛋白质的胶体性质与蛋白质的沉淀 三、蛋白质分离纯化的一般原则 四、蛋白质的分离纯化方法 五、蛋白质相对分子量的测定 六、蛋白质的含量测定与纯度鉴定 ;本 章 重 点;一　蛋白质的酸碱性质; 每种蛋白质都有它特有的等电点，这也是鉴别蛋白质的指标之一。;3. 等离子点;二 蛋白质的胶体性质与蛋白质的沉淀 ; 由于蛋白质分子很大，在水中形成胶体溶液。蛋白质主要是指球状蛋白质，它的亲水基团都在表面，因此与水有很大的亲和力，成为亲水胶体。 ;稳定亲水胶体的因素： 水化膜 表面电荷; 当破坏了维持蛋白质胶体稳定的因素甚至蛋白质的构象时，蛋白质就会从溶液中析出，这种现象称为蛋白质的沉淀。;;(1) 盐析法( salting out);(2) 有机溶剂沉淀法;重金属离子如Cu2+、Hg2+、Ag2+、Pb2+等带有正电荷，能与蛋白质分子中带负电的基团结合，生成不溶性的重金属蛋白盐而沉淀。;生物碱试剂(如鞣酸、苦味酸、钨酸等)，某些酸类(主要是指三氯醋酸、磺酰水杨酸和硝酸等)，与带正电的蛋白质 结合生成不溶性的盐而沉淀。;（5）加热变性;（一） 纯化的总目标 （二） 蛋白质分离纯化的一般原则 ;（一）目的 ;1、总目标 ;2、分离提纯的一般程序 ;第一步：前处理 ;①将组织和细胞破碎 动物组