基因治疗1的教案.pptxVIP

基因治疗1的教案;第一节 基因治疗的概念及其策略 第二节 基因治疗的基本程序 第三节 基因治疗的现状 第四节 基因治疗的靶向性 第五节 基因治疗存在的问题 第六节 基因治疗未来产业的展望 ; 狭义概念 将具有正常功能的基因置换或增补患者体内有缺陷的基因，从而达到治疗疾病的目的。 广义概念 将某种遗传物质转移到患者细胞内，使其在体内发挥作用，最终达到治疗疾病的目的。 ; 基因矫正 基因置换 基因增补 基因失活 “自杀基因”的应用 免疫基因治疗 耐药基因治疗 特异性细胞杀伤性基因治疗 生殖细胞基因治疗 ;（1）基因矫正（gene correction）对于致病基因中的异常碱基进行精确修复，使其恢复正常功能； （2）基因置换（gene replacement）用正常基因在原位替换致病基因，使细胞DNA完全恢复正常状态； （3）基因增补（gene augmentation）将正常基因导入患者体细胞内，使其整合到染色体中一起表达，以补偿缺陷基因的功能 ，但致病基因未去除。 ;（4）基因失活（gene inactivation）： 指将特定的反义核酸导入细胞，通过碱基互补作用与mRNA结合，阻断肿瘤细胞中基因的异常表达，以抗肿瘤、抗病毒。 反义RNA: 干扰mRNA的互补RNA; 反义DNA: 干扰DNA的互补DNA.;（5）“自杀基因”的应用 自杀基因 这种基因导入受体细胞后可产生一种酶，它可将 原无细胞毒性或低毒药物前体转化为细胞毒物质，将 细胞受体细胞杀死，这种基因被称为“自杀基因”。 自杀基因导入肿瘤细胞后，可将肿瘤细胞杀死。 但对正常细胞则无伤害作用。 ;（6）免疫基因治疗 将某些细胞因子（IL-2、GM-CSF等）基因导入肿瘤患者体内，以增强患者的抵抗力。 （7）耐药基因治疗 在肿瘤化疗过程中， 把产生抗药物毒性的基因导入患者体内，从而使患者能耐受更大剂量的化疗。 ;（8）化疗保护性基因治疗 向正常细胞内导入单相或多相细胞毒性药物的抗性基因，使正常细胞耐化疗药物的能力大大提高。 （9）特异性细胞杀伤性基因治疗 利用DNA重组技术构建以特异性杀伤靶细胞为目标的“神奇弹头” （10）生殖细胞基因治疗 生殖细胞或胚胎干细胞补偿性基因治疗; 第二节 基因治疗的基本程序;在了解疾病发生的分子机制基础上，选择对疾病有治疗作用的 特定基因。如对单基因缺陷遗传病，可用野生型（非突变）基 因即可用于治疗； 对于肿瘤，最好选择某些与该类肿瘤密切相关的癌基因或抑癌 基因用于基因治疗。 治疗性基因获得的方法很多： 用酶切或探针杂交法从基因组DNA文库获得，从cDNA文库 获取，PCR扩增，人工合成等。;基因治疗关键步骤之一，是将治疗基因高效转移入患 者体内、并能调控其适度表达。 常用的载体有两类：病毒载体和非病毒载体。 病毒载体：逆转录病毒、腺病毒、疱疹病毒、腺相关 病毒、痘苗病毒载体、HIV病毒载体、杆状病毒载体等 非病毒载体：脂质体、分子耦联载体、裸露DNA、染色 体载体、多聚物 ： 与病毒载体的主要区别在于：采用理化方法将治疗基 因转移入患者体内。;;在包装细胞中包装成假病毒;逆转录病毒载体的特点 （1）结构和感染过程与普通逆转录病毒相似； （2）可使靶细胞变成稳定表达目的基因的转化细胞； （3）感染靶细胞后不扩散； （4）假病毒感染靶细胞的效率非常高； （5）不感染非增殖细胞。;同时也存在一定的缺点: ①容量小，只能容纳8～10kb的外源基因片段； ②血清补体能使之失活； ③病毒滴度低，低于治疗大肿瘤需要的滴度； ④病毒整合到DNA后，可能引起插入突变和激 活癌基因的可能； ⑤宿主范围有限，只感染增殖细胞，故在应用 上有一定局限性。; 腺病毒载体 1、结构;2、腺病毒载体特点 （1）宿主范围广 （2）腺病毒蛋白表达不以宿主增殖为必要条件 （3）可获得高病毒效价 （4）重组体非常稳定 （5）不会引起肿瘤 （6）有较高的安全性 （7）无包膜，不易被补体灭活，可直接在体内应用 （8）不整合入染色体;3、腺病毒载体优点 （1）能够进行位点特异性整合 （