DNA的生物合成复制.pptxVIP

DNA的生物合成复制;?二、遗传的中心法则 DNA通过复制将遗传信息由亲代传递给子代；通过转录和翻译，将遗传信息传递给蛋白质分子，从而决定生物的表现型。DNA的复制、转录和翻译过程就构成了遗传学的中心法则。 ;在RNA病毒中，其遗传信息贮存在RNA分子中。因此，在这些生物体中，遗传信息的流向是RNA通过复制，将遗传信息由亲代传递给子代，通过反转录将遗传信息传递给DNA，再由DNA通过转录和翻译传递给蛋白质，这种遗传信息的流向就称为反中心法则。; 反映了从DNA?RNA?蛋白质的遗传信息主流，揭示了生物体内遗传信息的贮存、传递和表达的规律。;第一节DNA的复制;复制时，首先是DNA两条链间氢键断裂，双链彼此分开成两条单链，称为亲链。它们各自作为模板，以三磷酸脱氧核苷为原料，按碱基互补规律，合成一条与亲链完全互补的新链，称子链。子链与亲链重新形成双螺旋结构。 半保留复制的实验证据: 1958年Meselson和Stahl用同位素15N标记大肠杆菌DNA,首先证明了DNA的半保留复制。 ;该实验首先将大肠杆菌在含15N的培养基中培养数代后，使其DNA中的碱基氮均转变为15N。然后将大肠杆菌移至只含14N的培养基中同步培养一代、二代、三代。分别提取DNA，作密度梯度离心，将具有不同密度的DNA分离开。 ;DNA半保留复制的证据;2.半不连续复制 以3’→5’方向的亲代DNA链作模板的子代链在复制时基本上是连续进行的，其子代链的聚合方向为5’→3’，这一条链被称为领头链。 以5’→3’方向的亲代DNA链为模板的子代链在复制时则是不连续的，其链的聚合方向也是5’→3’，这条链被称为随从链。 领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 ;第10页/共39页;3.有固定的复制起始点 DNA在复制时，需在特定的位点起始，这是一些具有特定核苷酸排列顺序的片段，即复制起始点。 4.双向复制 DNA复制时，以复制起始点为中心，向两个方向进行解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 ;（二）半保留复制的意义 按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。 遗传的保守性，是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。 ;二、催化DNA复制的重要酶类 ;第14页/共39页;1.在原核生物中，目前发现的DNA聚合酶有三种，分别命名为DNA聚合酶Ⅰ（pol Ⅰ），DNA聚合酶Ⅱ（pol Ⅱ），DNA聚合酶Ⅲ（pol Ⅲ），这三种酶都属于具有多种酶活性的多功能酶。 参与DNA复制的主要是pol Ⅲ和pol Ⅰ。;DNA-pol有三种功能：①.聚合作用：即在模板指导下，以dNTP为原料，在DNA或引物RNA的3‘-OH末端逐个加上脱氧单核苷酸，形成3’，5‘磷酸二酯键，使DNA链沿5’→3‘方向延伸。②.3’→5‘外切酶活性：即能从DNA 链3’端开始沿3‘→5’方向进行水解反应，产生5‘单核苷酸。在DNA复制时，当3’末端出现错配的碱基时，可由DNA-polⅠ识别和切除错配的碱基，保证DNA复制的正确性，因而具有校对功能。③. 5‘→3’外切酶活性，即能从DNA 链5‘端开始沿5’→3‘方向水解DNA链。因此，参与RNA引物的切除。另外，它还能跳过几个核苷酸，切除错配的核苷酸，起到修复作用。实际上，DNA-polⅠ在大肠杆菌中的主要功能不是催化DNA的复制，而是切除引物，填补冈崎片段间的空隙，以及修复DNA损伤。;DNA-pol Ⅲ催化的聚合反应具有高度连续性，可以沿模板链连续地移动，一般在加入5000个以上的核苷酸之后才脱离模板，因此，其催化的聚合反应速度快，是在原核生物细胞内真正起复制作用的酶。其3＇→5＇外切酶活性可停止进入或除去错误的核苷酸，然后连续加入正确的核苷酸，因而具有编辑和校对功能，pol Ⅲ和polⅠ协同作用可使复制的错误率大大降低，从10-4降到10-6或更少。;2.在真核细胞至少有5种DNA聚合酶，分别称为DNA聚合酶α、β、γ、δ、 ε。 DNA聚合酶α和δ是DNA复制时起主要作用的酶，DNA聚合酶β主要参与DNA损伤的修复，DNA聚合酶γ存在于线粒体内，参与线粒体DNA的复制。;（二）拓扑异构酶：拓扑异构酶对DNA分子既能水解又能连接磷酸二酯键，其主要作用是解开DNA超螺旋结构。拓扑异构酶有两种，分别称为拓扑异构酶Ⅰ和拓扑异构酶Ⅱ。拓扑异构酶Ⅰ在不需要ATP存在的条件下，切断DNA双链中的一股,使DNA链末端沿松解的方向转动，使DNA分子变为松弛状态，然后将切口连接起来。拓扑异构酶Ⅱ能同时切开DNA链的两股，使其变为松弛状态，然后再封闭切口；在利用ATP的条件下，可使松弛状态的DNA分子变为负超螺旋，有利于DNA双链分开。;（三