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实验内容 录像:鸡胚接种 示教:四体的形态、病毒的病变效应 操作:病毒脑内接种、鸡胚接种 * 螺 旋 体(spirochetes) 是一类细长而柔软、弯曲呈螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。根据螺旋体的大小、螺旋数目、规则程度及螺旋间距等分为—— 疏螺旋、密螺旋、钩端螺旋体。 * 疏 螺 旋 体 回归热—有3-10个不规则的螺旋 * 密 螺 旋 体 梅毒螺旋体 螺旋体细长,有8-14个致密而规则的小螺旋,两端尖直。 镀 银 染 色 法 * 钩端螺旋体 螺旋细密和规则,菌体一端或两端弯曲使菌体呈钩状。 镀 银 染 色 法 * 衣 原 体(Chlamydia) 沙眼衣原体 —— 在眼结膜上皮细胞质内、 核旁堆积形成包涵体。呈 桑椹状或帽状。 专性真核细胞内寄生和繁殖。有原体和始体两种发育型。 * * 支 原 体 (mycoplasma) 油煎蛋样菌落 无细胞壁的原核生物,多形性,能在无生命培养基中生长繁殖。 * 立克次体 立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物 革兰染色阴性,但一般着染不明显,因此常用Giemsa染色,将立克次体染成紫或蓝色 * 恙虫热立克次体 观察感染细胞内的恙虫热立克次体:注意在单核细胞浆内靠近细胞核旁边,有成堆的紫蓝色的球杆状的立克次体。 * Giemsa染色,将立克次体染成紫或蓝色 立克次体是一类严格细胞内寄生的原核细胞型微生物 * 病 毒(Virus) 病毒感染的检测方法 动物接种—选用敏感动物及适宜部位接种 (乙脑病毒—小白鼠脑内) 鸡胚培养—孵化9-12天的鸡胚,接种鸡胚不同部位 (流感病毒—尿囊腔) 细胞培养—病毒在敏感细胞内增殖引起细胞病变 (CPE—细胞病变效应;包涵体) * 正常细胞 病毒感染细胞(CPE) * 包涵体 胞浆、胞核内出现的圆形或椭圆形、嗜酸或嗜碱性的小体 狂犬病毒包涵体—内基小体 (Giemsa染色) * 病毒培养:鸡胚接种 鸡胚培养 鸡胚绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊鉴定:病毒增殖,鸡胚发生异常变化或羊水、尿囊液出现红细胞凝集现象 意义:常用于流感病毒等的分离培养 * * * 鸡胚接种 鸡胚在照蛋灯下标出气室和接种点,接种点一定要避开胚体和大血管。 用碘酒及酒精在标记处消毒,用打孔器按先气室后接种点的顺序打孔。 用注射器倾斜插入鸡胚2~3毫米,注入病毒0.2毫升。 用溶化石蜡按先接种点后气室的次序封口。 鸡胚上注明班级、姓名、周四上午、C307等 鸡胚置孵箱培养72小时后收获。 * 小白鼠脑内接种 碘酒及酒精在接种部位(眼角与耳根连线的中点)消毒 用注射器倾斜进针2~3毫米,注入病毒0.02~0.03毫升 * 实验报告 六张示教图 *
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