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小篮子法测呼吸第1页/共12页第2页/共12页小篮子法测定呼吸速率 广口瓶法或滴定法 第3页/共12页目的和意义呼吸作用是反应植物生命活动强弱的重要指标之一。常用于植物生理研究及农业生产实践等方面。 有氧呼吸的方程式: C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O 测定CO2 释放量的方法: 滴定法、红外线CO2分析仪法 测定 O2吸收量的方法: 氧电极法第4页/共12页小篮子法测定呼吸速率的原理在广口瓶中,放入一定量的Ba(OH)2溶液,用其吸收植物材料呼吸过程中释放的CO2。然后用草酸溶液滴定剩余碱量,由空白和样品二者消耗草酸溶液之差,计算出呼吸过程中释放的CO2量。 反应如下: Ba(OH)2 + CO2 BaCO3+H2O (1) Ba(OH)2(剩余)+H2C2O4 BaC2O4+2H2O(2)第5页/共12页实验材料:萌发的小麦和大麦种子主要实验仪器: 1、广口瓶测呼吸装置: 广口瓶一只,加一只三孔橡皮塞,一孔插入装有碱石灰的漏斗,漏斗口塞棉花,将压碎的碱石灰粉末覆盖于棉花上,能吸收进入瓶中的CO2,另一小孔供滴定用,平时用一小橡皮塞塞紧;第三孔插入温度计,记录测定时的温度。瓶盖下面装一小钩,以悬挂小筐,供装植物材料用。 2. 酸式滴定管:装草酸 第6页/共12页四、试剂Ba(OH)2溶液1/44 mol/L草酸溶液:每ml溶液相当于1mg的CO2 0.05 mol/L-1Ba (OH)2溶液(密封保存) ,溶液配好后先过滤到试剂瓶中,塞紧试剂瓶,尽量减少溶液曝露在空气中的时间,以减少BaCO3 沉淀的产生酚酞指示剂:1g 酚酞溶于100 ml 95%乙醇中第7页/共12页五、实验步骤1、空白滴定: 通过滴定孔向广口瓶内放入Ba(OH)2溶液20 ml,加入2滴酚酞试剂。 塞紧小橡皮塞,摇动广口瓶几分钟,使瓶内CO2 充分吸收。待瓶内CO2吸收后,拔出小橡皮塞,把酸式滴定管插入小孔中,用草酸滴定,至红色刚刚消失为止。记下草酸溶液用量的毫升数,即为空白滴定值。第8页/共12页2、准备植物材料:取待测小麦或大麦种子8 g(约100粒) ,在天平上称出重量,装在小篮中。 第9页/共12页3、正式滴定: 3.1 萌发的种子 倒出废液,用蒸馏水洗凈广口瓶,重加20 ml Ba(OH)2溶液于瓶内,将装有待测种子的小篮迅速挂在小钩上,塞紧瓶塞。 3.2 煮熟的种子 方法同上。 第10页/共12页开始记录时间,30分钟后,小心打开瓶塞,迅速取出小篮,立即重新盖紧瓶塞,充分摇动2分钟,使瓶内CO2的完全被吸收,从滴定孔中滴入2滴酚酞。其余操作如前,记下草酸用量,即为样品滴定值。 第11页/共12页六、计算呼吸速率 (空白滴定值-样品滴定值)× mg CO2呼吸速率= 植物组织鲜重 ×时间 呼吸速率的单位一般可采用mg(CO2) · g-1 FW · h-1, mg CO2·ml-1草酸=1 第12页/共12页感谢您的欣赏
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