A原核调控课稿.pptxVIP

A原核调控课稿; 第一节 转录水平的调控 一. 相关概念： ;;二、操纵子模型（operon）;乳糖操纵子;1. 三个调控元件 (1) CAP(catabolite gene activation protein) or CRP(cAMP受体蛋白)结合位点： 在启动子的-62bp附近有一个正调控元件，提供CAP-cAMP复合物结合的激活物位点。 (2)启动基因或启动子：在启动子的-35~-6bp区域是RNA聚合酶的识别位点和结合位点。 (3)操纵基因Operator ：在启动子下游邻接区含有一段回文序列，是一个顺式负调节元件，不编码蛋白质，仅供阻遏蛋白识别和结合。 2.诱导物为别乳糖：乳糖的代谢产物之一 3.阻遏蛋白：调节基因lacI的产物 阻遏蛋白：识别并结合在操纵基因上阻遏转录； 别乳糖：与阻遏蛋白结合使其失活诱导转录。 ; CAP结合位点 ;CAP-cAMP的活性依赖于细胞内的cAMP水平，而cAMP与细胞内葡萄糖水平成反比。 在减少cAMP水平时，葡萄糖的作用是剥夺了一个操纵子表达时所需要的调控因子，也称葡萄糖抑制。;第9页/共40页;;第11页/共40页;; 阻遏蛋白和操纵基因的结合与解离;第14页/共40页;诱导物的结合解离模型;诱导物和阻遏蛋白结合的模型;诱导物：别乳糖;安慰诱导物（gratuitous inducer）： 能诱导酶的合成，但不被酶分解的分子。 如：异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）：与β-半乳糖相似，虽不为β-半乳糖苷酶所识别，但也是lac操纵子十分有效的诱导物。常用于进行各种实验。 ;诱导物的加入和去除对lac mRNA的影响;第20页/共40页;第21页/共40页; （二）诱导和阻遏;1. trp 操纵子的结构;2.特点: (1) trpR(89’)和trpABCDE(25’)不连锁； (2) 操纵基因在启动子内 (3)启动子和结构基因不直接相连，二者被 前导顺序(Leader)所隔开 (4)有衰减子(attenuator):在一些合成代谢操纵子的前导区内，存在着类似终止子结构的一段DNA序列，可以辅助阻遏作用进行转录的调控。;第25页/共40页;3.调节;衰减作用 1978年 yanofsky发现衰减子（attenuator） 研究trp操纵子的mRNA时发现的，在第一个基因trpE的前端长约160bp的序列，称前导序列； 当其发生缺失突变时（缺失130-160bp的片段），产生的mRNA总是最高水平，表明其对转录具有衰减作用，称衰???子； 结构特点（1）前导序列编码14个aa的前导肽；（2）衰减子区可转录出140nt的转录物。 ;(1)前导肽的结构;衰减子区转录产物的结构：;核糖体所处的位置决定衰减子不同二级结构的形成：;第二节 操纵子的其它调控形式;; gal 操纵子的结构; 3.调节;二阿拉伯糖操纵子(ara O); ara 操纵子的结构;;;3.调节;感谢观看！