实验二通课的课件资料.pptxVIP

实验二通课的课件资料;内 容 提 要;;分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，主要是分枝菌酸，它包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般不易着色，要通过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝菌酸与染料结合后，很难被酸性脱色剂脱色，故名抗酸染色。 齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红结合成牢固复合物，用3%盐酸酒精处理也不脱色。当再用碱性美蓝复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其它细菌及背景中的物质为蓝色。; 细菌：卡介苗 染液：石炭酸复红液、3%盐酸酒精、碱性美蓝溶液 其它：接种环、酒精灯、载玻片，玻片夹等 　　;1、细菌涂片的制备 涂片 干燥 固定 2、染色 1）初染：用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高处（2～10cm）徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，加热3～5min，若染液蒸发减少，应再加染液，以免干涸，待标本冷却后用水冲洗。 2）脱色：3%盐酸酒精脱色30s～1min；用水冲洗。 3）复染：用碱性美蓝溶液复染1min；用水冲洗后用吸水纸吸干。 ; 五、实验结果 ; 结核杆菌呈红色，常堆积成团，排列无序，偶呈分枝状生长。背景及非抗酸性细菌呈蓝色。; 六、注意事项 ;二、肠道致病菌的分离培养 （88页） ;;;1、相似的形态染色—从形态上无法区别 ;乳糖发酵试验 ; -/+ ;胆盐抑制G+,枸橼酸钠和煌绿能部分抑制大肠杆菌,致病的沙门菌和志贺菌能大量生长。 中性红指示剂和乳糖,中性红遇酸变粉红。 常用于肠道致病菌的分离培养。 ;细菌 SS平板 大肠杆菌 粉红色大菌落 痢疾杆菌 无色细小 半透明菌落 伤寒杆菌 无色细小 半透明菌落 ;大肠杆菌; 将粪便标本以平板分区划线法接种到SS培 养基。 (每个实验室8个SS平板，每组做好标记，班长用胶布按班级绑好) 放入37℃温箱中培养24小时。取出放4℃冰 箱中保存备用。;;;每个班2个血液琼脂培养基 取血琼脂平板1块，打开平皿盖，将培养基面置于口腔前10cm处，受试者用力咳嗽几次； 盖上平皿盖，置37℃温箱中倒置培养24h后取出观察结果。 ;???法：取一普通琼脂培养基， 一部分写上“前”，另一部分 写上“后”，然后将手指在写 有“前”的部分按一下，再将 手指用酒精进行消毒，待干 后，在写有“后”的部分按一 下。放入37℃温箱培养24小 时后观察。 ;实验报告; 预 习;谢谢观看！