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人脐带间充质干细胞操作规范 2.将培养瓶内的细胞用0.25%胰酶消化，离心收集细胞，弃上清液; 3.加入适量生理盐水混匀，用70 μm滤网过滤去除组织块，即得到P1代脐带间充质干细胞; 4.细胞计数，按10/瓶接种，每瓶加入10 ml脐带无血清培养液(UltraCULTURE + 2% Ultroser G + 1% Glutamine + 1% MEM NAA)，每3天换一次液; 5.细胞融合率达到80%左右时，重复以上步骤进行传代。 三、细胞冻存 1.细胞生长至80%左右时，加入10% DMSO，混匀; 2.将细胞悬液分装至冻存管中，每管2×10^6个细胞，放入-80℃冻存盒中，-80℃