42个家猪脑组织形态及生物力学特性时序性变化规律.docxVIP

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42个家猪脑组织形态及生物力学特性时序性变化规律 死亡时间(pm)是确定死亡事件、线索、范围、嫌疑人、事件性质、事件过程和其他事项的重要证据价值。 1 材料和方法 1.1 仪器和试件 正规屠宰场放血处死的成年家猪, 4月龄, 体重120~150 kg, 共42个全脑组织。 便携式生物力学检测仪 (KDI-0.2, 与深圳市凯强力科技有限公司合作研制, 配置的拉压传感器适当, 测力范围2~1 000 N, 测力分辨率±1/250 000, 测力精度±1%, 位移精度±0.5%, 变形精度±0.5%, 尤其适合经福尔马林液固定的生物组织力学测试, 防止酸性福尔马林液对各种夹具的腐蚀) , 数字游标卡尺 (深圳市新佰特电子有限公司) , RXZ智能型人工气候箱 (宁波江南仪器制造厂) , 自制专用可调固定间距的试件取材刀具。 1.2 glee嗜银染色组织病理学检测 提取全脑组织后置于25℃恒温、75%恒湿人工气候箱内, 保鲜薄膜覆盖, 根据定时、定位、定向、定比、定量、定形“六定”规范冠状面切取脑组织。具体步骤如下:设计6个时间组 (定时) , 分别为0、12、24、36、48、60 h;在左右大脑额叶上中部 (定位) , 于冠状面自表向里 (定向) 切取脑组织, 确保脑组织皮质-白质比例1∶1;按检材质量与固定-萃取液体积比1∶10 (定比) 放入10%甲醛溶液固定3 d后, 电子游标卡尺测量切取2.0 cm×1.5 cm×1.5 cm (定量) 长方体 (定型) 脑组织试件, 同时制作生物力学试件和组织切片。 常规HE染色和Glee嗜银染色组织切片, 生物显微镜 (Leica DM2000+DFC295, 德国) 观测脑组织形态学, 病理图像量化分析软件IPP 6.0测算不同时间点Glee嗜银特殊染色脑组织间隙面积、累积光密度 (integrated optical density, IOD) 值等指标。 如图1所示, 脑组织试件皮质面向上放置载物台, 进行单向纵轴压缩测试, 参数设置为测量误差0.1%、预载加力50 m N、运行速度10 mm/min、压缩变形厚达4 mm时自动停机, 屏幕显示极限载荷 (材料压缩到最大程度时所承受的极限载荷值, 反映材料抵抗破坏和变化的能力, 是材料性质的一个主要的总体检测指标) 、应力 (材料单位面积上的内力, 反映材料强度和刚度, 是比较不同材料之间的一个有意义指标) 、应变 (又称“相对变形”, 物体由于外因如载荷、温度变化等, 使它的几何形状和尺寸发生相对改变的物理量) 、弹性模量 (应力与应变的比值, 即单位面积上承受的力) 、平均力 (材料被压缩过程中, 若干时间点受力的平均值) 、断裂能量 (载荷-变形曲线下面积, 即组织结构断裂所需能量) 等。 1.3 统计学分析方法 采用SPSS 16.0等软件进行统计分析, 各组数据以均数±标准差表示, 采用线性回归、单因素方差分析和两两比较 (相邻时间组) 等统计学分析方法。P0.05表示显著性差异, P0.01表示高度显著性差异。 2 结果 2.1 社会学观察 2.1.1 无光泽、嘴唇、发臭、腐败液渗透、泡沫样器官的演变 随着PMI延长, 脑组织从有一定的光泽、弹性、质软、无臭, 逐步演变到无光泽、污秽、瘫软、发臭、腐败液渗出、泡沫样器官 (见表1) 。 2.1.2 社会学观察 2.1.3 pm的相关性意义 图3所示为Glees神经纤维染色脑白质组织的显微体视学观测间隙总面积及其IOD值随PMI的变化趋势。0~48 h, 间隙总面积及其IOD值随PMI延长呈时序性升高趋势, 间隔12 h组间比较差异高度显著 (P0.01) , 与PMI相关回归方程分别为:y=1.115x+13.21;y=2.61x+28.01。校正决定系数 (adjust R 2.2 极限载荷分布 由表2可知, 各时间组脑组织的压缩极限载荷、平均力、弹性模量、断裂能量参数, 均随PMI呈时序性降低趋势。同一时间点各参数均符合总体方差齐性, 服从正态分布。0~12 h呈平缓“前平台期”, 12~60 h呈明显下降趋势, 总体比较差异显著 (P0.05) 。其中, 极限载荷的各组间比较呈高度显著性差异 (P0.01) 。 如图4所示, 死后12~60 h脑组织的各项生物力学参数, 以时间为因变量, 以极限载荷、平均力、弹性模量、断裂能量为自变量的线性回归方程分别为: 校正系数 (adjust R 3 组织生物力学特性检测 本文基于生物软组织具有各向异性黏弹性和非均质性, 不同器官或同一器官不同部位存在差异性的特点 脑组织位于封闭颅腔内, 与外界隔离, 死后不易受环境因素影响, 故脑组织的死后组织形态结构及其生物力学特性变化, 与其他脏器比较, 必然存在其“特殊”、“稳定

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