温度ph激活剂和抑制剂对酶活性的影响.docxVIP

（一）、温度、PH对酶活性的影响 一、 实验目的 了解温度对酶活性的影响。了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。 二、 实验原理 三、 实验步骤 1、温度对酶活性的影响 取3支试管，编号后按下表加入试剂 试剂 1 试管编号 2 3 0.2%淀粉溶液 1.5 1.5 1.5 稀释唾液/ml 1 无 1 煮沸过的稀释唾液/ml 无 无 1 摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10min后取 出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀 粉酶水解的程度。将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min后，再用 碘液检验，结果如何？记录并解释结果。 注意事项： 1、 唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5?1min 后，使其流入量筒，并稀释到50ml。 2、 PH对酶活性的影响 取4个标有号码的20ml试管。用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和 0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0?8.0的4种缓冲液。 试剂0.2mol/L磷酸氢二钠/ml0.1mol/L 柠檬酸 试剂 0.2mol/L磷酸氢二钠/ml 0.1mol/L 柠檬酸/ml PH 1 2 3 4 5.15 6.05 7.72 9.72 4.85 3.95 2.28 0.28 5 5.8 6.8 8 试管编号 从4个试管中各取缓冲液3ml,分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添 加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。将 各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。 第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴 碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或 2滴碘化钾-碘溶液。添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。 观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。 注意事项: 1、从第三管中取混合液，是因为它的PH接近唾液淀粉酶的最适PH。 2、间隔1min，是为了有足够的时间去加稀释唾液和足够时间观察颜色，保证各试管 反应时间才目同。 四、实验结果 1、温度 浅蓝一半暗一半浅深蓝2、 浅蓝 一半暗 一半浅 深蓝 2、PH 分析: 酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的反应速度最高。唾液淀粉酶的最适温 度为37摄氏度。低温抑制酶的活性，高温使酶失活。淀粉遇碘显蓝色，按其分解程度由低到 高会依次出现蓝色、紫色、暗褐色、无色。所以可用碘来检验其水解程度。 PH也能影响酶的活性，在最适PH下，酶的活性最大，偏酸、偏碱都降低酶的活性，唾 液淀粉酶的最适PH为6.8。 （二）、激活剂和抑制剂对酶活性的影响 一、 实验目的 了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 二、 实验原理 三、 实验步骤 取4支试管按下表加入试剂，观察现象并记录。 试剂 1 试管编号 2 3 4 0.1%淀粉溶液/ml 1.5 1.5 1.5 1.5 1%CuSO4 溶液/ml 0.5 无 无 无 1%Nacl 溶液/ml 无 0.5 无 无 1%Na2SO4 溶液/ml 无 无 0.5 无 蒸馏水/ml 无 无 无 0.5 稀释唾液/ml 0.5 0.5 0.5 0.5 37摄氏度恒温水浴5min 碘化钾-碘溶液/滴 2 2 2 2 四、实验结果 1 2 3 4 分析： 酶的活性受激活剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。 激活剂使酶的活性升高，抑制剂使酶活性降低。 加入Na2SO4是为了消除Na+和SO42-对酶活性的影响。