一种牛筋草高效再生体系的构建方法发明专利.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 108184664 A (43)申请公布日 2018.06.22 (21)申请号 201711350046.6 (22)申请日 2017.12.15 (71)申请人 华南农业大学 地址 510642 广东省广州市天河区五山路 483号 (72)发明人 董朝霞　沈雪峰　杨九铃　魏吉平　 陈勇　 (74)专利代理机构 广州市华学知识产权代理有 限公司 44245 代理人 崔红丽　裘晖 (51)Int.Cl. A01H 4/00(2006.01) 权利要求书1页 说明书5页 附图4页 (54)发明名称 一种牛筋草高效再生体系的构建方法 (57)摘要 本发明公开一种牛筋草高效再生体系的构 建方法，属于杂草抗药性领域。该方法以成熟的 敏感型牛筋草种子为外植体，建立其再生体系； 包括愈伤组织的诱导和继代、分化培养基、生根、 炼苗、移栽等步骤。该方法的特点在于(1)污染率 低；愈伤诱导率、分化率高。(2)愈伤水渍化程度 低。(3)再生周期短，再生率高。 A 4 6 6 4 8 1 8 0 1 N C CN 108184664 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.一种牛筋草高效再生体系的构建方法，其特征在于包括如下步骤： (1)愈伤组织的诱导和继代：牛筋草种子去皮，-20℃冷冻20～30d后，于75％酒精浸泡， 用0.05％～0.2％HgCl 消毒灭菌10～20min后，在无菌条件下，用无菌水反复清洗，风干，接 2 入诱导培养基IC中；30～40d后，将产生的愈伤组织转入继代培养基AC中进行继代培养，每 30～40d继代一次，继代2～3次；再进行预培养3～4d，选取淡黄色、结构紧凑、颗粒状的胚性 愈伤组织作为后续的材料；培养条件：25±2℃、24h黑暗； (2)分化培养基：将步骤(1)得到的胚性愈伤组织转接到分化培养基DC中，进行分化培 养；培养条件：25±2℃，12h光照培养； (3)生根、炼苗、移栽：待分化苗生长至4～6cm时，将分化苗接到生根培养基RC中，25±2 ℃、12h光照培养，待根系达4～6cm时，炼苗3～4d后，移栽成活。 2.根据权利要求1所述的牛筋草高效再生体系的构建方法，其特征在于： -1 -1 所述的诱导培养基IC：N +0.5～2mg ·L  2,4-D+0.6～1g ·L 水解酪蛋白+(30±1)g· 6 -1 -1 L 蔗糖+7～8g ·L 琼脂，pH＝5.8±0.1。 3.根据权利要求1或2所述的牛筋草高效再生体系的构建方法，其特征在于： -1 -1 所述的诱导培养基IC：N +0.5～1mg ·L  2,4-D+0.6～1g ·L 水解酪蛋白+(30±1)g· 6 -1 -1 L 蔗糖+7～8g ·L 琼脂，pH＝5.8±0.1。 4.根据权利要求1所述的牛筋草高效再生体系的构建方法，其特征在于：