【高考生物复习】基因工程.pptxVIP

;;考点一　基因工程的操作工具;;1.基因工程的概念 (1)供体：提供 。 (2)操作环境： 。 (3)操作水平： 水平。 (4)原理： 。 (5)受体：表达目的基因。 (6)本质：性状在 体内的表达。 (7)优点：克服 的障碍，定向改造生物的 。;2.DNA重组技术的基本工具 (1)限制性核酸内切酶(简称：限制酶) ①来源：主要是从 生物中分离纯化出来的。 ②作用：识别特定的 并切开特定部位的两个核苷酸之间的_____ _______。 ③结果：产生 或平末端。 (2)DNA连接酶 ①作用：将限制酶切割下来的DNA片段 。;②类型;归纳总结;答案;深化拓展;1.有关工具酶的判断 (1)限制酶只能用于切割目的基因(　　) (2)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列(　　) (3)DNA连接酶能将两碱基间通过氢键连接起来(　　) (4)E·coli DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端(　　) (5)限制酶也可以识别和切割RNA(　　) (6)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶 (　　);2.有关载体的判断 (1)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因(　　) (2)每个质粒DNA分子上至少含一个限制酶识别位点(　　) (3)质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体(　　) (4)载体的作用是将携带的目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达 (　　) (5)外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制(　　);下图中的图1和图2分别表示的是EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意图，据图分析：;(1)请说出EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶识别的碱基序列及切割的位点。 提示　EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是GAATTC，切割位点在G和A之间；SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是CCCGGG，切割位点在C和G之间。 (2)以上实例说明限制酶有何特性？ 提示　说明限制酶具有专一性。;A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同 B.图2中酶切产物可用于构建重组DNA C.泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物 D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA;解析　通过图1可知，两种限制性核酸内切酶切割DNA分子的不同部位，说明两种限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列不同，A正确； 图2中的酶切产物是DNA分子片段，可用于构建重组DNA，B正确； 观察图1可知，该DNA片段有3个SalⅠ酶切位点，故用SalⅠ处理后，可形成4个DNA分子片段，电泳后出现4条电泳带，C正确； 限制性核酸内切酶作用的是双链DNA片段，因此图中被酶切的DNA片段应是双链DNA，D错误。;2.用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14 kb(1 kb即1 000个碱基对)的长链，而同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端)。;3.(2016·全国Ⅲ，40)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的识别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。;解析　分析图(a)可知，限制酶Sau3AⅠ与BamHⅠ切割DNA后形成的黏性末端相同，故经这两种酶切割得到的产物可以用DNA连接酶进行连接。;(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_______，不能表达的原因是______________________________________ ________________________________________________________。;(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有________________和______________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是___________ _____。;科学思维;命题点二　载体的应用分析 4.(2019·辽宁辽南协作校高三一模)质粒是细菌中的有机分子，下列对其描述，正确的是 A.质粒完全水解后最多可产生4种化合物