DB23-T1337-2009马铃薯中龙葵素的测定.pdf

ICS 67.080X 24DB23备案号：黑龙江省地方标准DBZ/T2009马铃薯中龙葵素的测定2009-2009-队文发布实施黑龙江省质量技术蓝督局发布 DB××/T ××××—2009前言本标准由黑龙江省农业委员会提出。本标准由黑龙江省农业标推化技术委员会归口。本标准由东北农业大学食品学院起草。本标准主要起草人：张英华、于国萍、张立刚、姜巍巍。 DB××/T ××××—2009马铃薯中龙葵素的测定1范围本标准规定了马铃薯中龙葵素的测定方法。本标准适用于马铃薯中龙葵素的测定。本方法的线性范围为10μg/mL～50μg/mL。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法。3　方法原理用乙醇提取马铃薯中龙葵素，在酸性条件下龙葵素与甲醛形成稳定的紫红色络合物：其含量与吸光度呈正相关。4试剂与仪器4.1试剂所用试剂均为分析纯；试验用水应符合GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法规定的三级水的要求。a)95%乙醇:b）氨水：1%;c）硫酸：1%:d）甲醛：1%;e）龙葵素标准品（α一茄碱，纯度≥95%);f）龙葵素标准贮备液：准确称取0.1g（精确到0.0001g）龙葵素，以1%硫酸溶液溶解并定容至100mL，此溶液中龙葵素浓度为1mg/mL，该溶液在4℃条件下保质期为六个月。4.2仪器a）控温磁力搅拌器：b）匀浆机：c）旋转蒸发器：d）循环水式真空泵;e）分光光度计；f）高速离心机；g）精密 pH计;h）天平：感量0.001g;i）天平：感量0.0001g。5测定方法 DB××/T ××××—20095.1样品处理取可食部分马铃薯20g（精确到0.001g），将马铃薯切成小块，移入匀浆机中，加100mL95%乙醇，匀浆3min。将匀浆液用离心机以4000r/min离心10min，取上清液，残渣用20mL乙醇洗涤两次，合并上清液。将上清液于旋转蒸发器上浓缩至近于。用1%硫酸溶液溶解浓缩物，过滤，将滤液用浓氨水调pH至10.0，在80℃水浴中加热5min：冷却后置冰箱中过夜，使龙葵素沉淀完全。离心：倾去上清液：以1%氨水洗沉淀，将沉淀用1%硫酸溶液溶解并定容至10mL，此为龙葵素提取液。5.2测定5.2.1标准曲线制作将龙葵素贮备液配成100ug/mL浓度的标准使用液。分别吸取0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL龙葵素标准使用液，相当于0、10、20、30、40、50ug于10mL比色管中，用1%硫酸溶液补足至2mL，得标准浓度系列，在冰浴中各滴加浓硫酸至5mL（滴加速度要慢，时间应不少于3min），摇匀。静置3min，然后在冰浴中滴加1%甲醛溶液2.5mL。静置90min，于520nm波长下测吸光度，以龙葵素的含量为横坐标，以吸光度为纵坐标作图，绘制标准曲线。5.2.2样品测定吸取样品龙葵素提取液2mL于10mL比色管中，按5.2.1中相同的方法显色、比色，测定其吸光度。100-++....+*++..**.. (1)m2 ×V式中:由标准曲线查得的龙葵素的量mg：-样品质量g;V一一测定时吸取样品提取液的体积mL；-样品提取后定容总体积mL。