HJ 1016-2019水质 致突变性的鉴别蚕豆根尖微核试验法.pdf

HJ中华人民共和国国家环境保护标准HJ1016—2019水质致突变性的鉴别蚕豆根尖微核试验法Water quality-Identification of mutagenicityViciafaba root-tipmicronucleus test2019-04-13发布2019-09-01实施生态环境部发布 HJ1016—2019中华人民共和国生态环境部公告2019年第13号为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护生态环境，保障人体健康，规范生态环境监测工作，现批准《水质联苯胺的测定高效液相色谱法》等三项标准为国家环境保护标准，并予发布。标准名称、编号如下。、《水质联苯胺的测定高效液相色谱法》（HJ1017—2019)；二、《水质磺酰脲类农药的测定高效液相色谱法》（HJ1018一2019)：三、《水质政突变性的鉴别蚕豆根尖微核试验法》（HJ1016—2019)。以上标准自2019年9月1日起实施，由中国环境出版集团出版，标准内容可在生态环境部网站(/hjbhbz/）查询]。特此公告。生态环境部2019年4月13日 HJ1016—201912精密度6家实验室分别对空白样品（平均MCN=3.6%o），p=2.0mgL（平均MCN=11.1%）、p=20.0mg/L（平均MCN=23.3%e）、P=50.0mg/L（平均MCN=30.1%）的自制环磷酰胺参比样品，阴性实际样品（地表水，平均MCN=3.9%e）、阳性实际样品（化工废水，平均MCN=8.6%e）的蚕豆根尖微核率进行了测定，每个样品均平行测定6次。实验室内的相对标准偏差范围分别为16%~38%、10%～16%、8.7%~16%、7.3%~13%、25%~45%、15%~34%：实验室间的相对标准偏差分别为7.4%、8.9%、3.9%、3.6%、7.4%、.4.2%.13质量保证和质量控制13.1有丝分裂指数：试样、空白试样、参比试样等处理后的所有进行镜检的根尖，每一根尖的细胞微核计数区有丝分裂指数应大于20%，否则该根尖微核计数结果无效。13.2对照试验：对照试验结果符合下列要求，试验结果方为有效。否则，查明原因后重新进行试验。a）阴性对照根尖处理后，根尖不得有急性毒性症状，且MCN≤实验室历史累积MCN上限（参考值6.6%)。b）阳性对照根尖处理后，根尖不得有急性毒性症状，且MCN=23.3%±7.5%，即15.8%o~30.8%14度物处理实验中产生的具有急性毒性或致突变性的废物按危险度物，其他按一般废物，分类集中收集，并做好相应标识，委托有资质单位进行处理。 HJ1016—2019附录A（资料性附录）有丝分裂各期细胞、根尖细胞微核计数区及微核判定参考图片蚕豆根尖有丝分裂各期细胞、细胞微核计数区及微核判定参考图片，见图A.1～图A.3。分聚末期：两套子染色体到适组胞两极，逐新变成细长而盘曲的荣色质丝线，纺懂丝消失，核膜出现包围象色体形成新分聚后期：每条染色体的着糕点一分为二，染色组脑核，赤道板经置出现细胞板。体分为两条子案色体，由纺缅丝牵引看分别向组胞的两极移动。分限同期：有丝分裂期核仁及核膜完整。分聚中期：分表前期：防懂丝率引每条染色体的着丝核仁逐渐解体，核膜速渐消失，荣色点运动并排列在细胞中央的亦道板质丝继绕、缩短、变粗成为染色体。染色上，染色体形态稳定，数目较清晰。保收乱地分布在防懂体中央，图A.1有丝分裂各期细胞参考图（放大400倍）（冠锁计区）初生分生组1.0 mm1.0 mm图A.2根尖细胞微核计数区示意图 HJ1016—2019典型微核照片（放大400倍）典型伤微核照片（放大400倍）图A.3微核和伪微核判定参考图 HJ1016—2019附录B（资料性附录）松滋青皮豆特性及保种B.1特性松滋青皮豆是20世纪80年代经华中师范大学生物系筛选出用于蚕豆根尖微核试验的敏感豆种，经长期纯化保种，其遗传特性相对稳定，对致突变物较为敏感，作为水样致突变性试验的受试生物被国内广泛接受。用于试验和保种的松滋青皮豆均应有可靠证明溯源至上述豆种。a）松滋青皮豆属中粒蚕豆，其千粒重一般为706~787g，参见图B.1。图B.1松滋青皮豆b）正常健壮的松滋青皮豆，经没种（8.2）、催根（8.3）后，出根率一般≥90%。试验开始前，豆种自然晾晒2~3d有利于出根。c）出根良好的豆种，催根（8.3）结束时，根长1.5～2.0cm、发育良好、粗细一致的根尖一般≥25%。d）试验豆种应满足13.1~13.2的要求。B.2保种a）用于保种的松滋青皮豆，须挑选颗粒饱满、豆皮青绿或青棕色、大小一致、无病虫害、表面无明显缺损的豆种。b）松滋青皮豆在我国大部分地区均可引种紫殖，根据当地气候条件合理安排种植时间：c）种植地应选择生态条件较好，无工业“三废”、农药和放射性污染的场地：d