SN_T 4144-2015出口动物源性食品中卡拉洛尔残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4144-2015出口动物源性食品中卡拉洛尔残留量的测定　氵液相色谱-质谱/质谱法Determination of Carazolol in foodstuffs of animal origin for export-LC-MS/MS method2015-09-01实施2015-02-09 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局刮涂新祥 SN/T 4144—2015前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准主要起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国重庆出入境检验检疫局本标准主要起草人：陈冬东、李贤良、于静、存显、李淑娟、周超、彭涛一 SN/T 4144—2015出口动物源性食品中卡拉洛尔残留量的测定‧液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了出口动物源性食品中卡拉洛尔的液相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于猪肉、鱼肉、虾肉、肝脏、肾脏、脂肪、奶、鸡蛋和蜂蜜中卡拉洛尔的测定和确证。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中的卡拉洛尔用甲醇（脂肪用乙酸乙酯-正已烷溶解提取）提取，提取液经.MCX柱净化（脂肪用GPC净化)后，供液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法峰面积定量。4试剂和材料除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1甲酸:色谱级。4.2正已烷：色谱级。4.3乙睛:色谱级。4.4甲醇：色谱级4.5乙酸铵色谱级。4.6 三乙胺。4.7乙酸乙酯。4.8环已烷。4.95%三乙胺甲醇：取三乙胺（4.6)5 ml，加甲醇（4.4)95 mL，混匀。4.10乙酸乙酯-环已烷（1十1，体积比）溶液：将乙酸乙酯（4.7）和环已烷（4.8）等体积混合。4.1150%乙腈溶液：将乙腈（4.3)与水等体积混合。4.12乙睛饱和正已烷：量取100ml正已烷和100ml乙睛，充分混匀，静置分层，取下层溶液待用。卡拉洛尔标准品：分子式C1sH2N2O2，CASNo.57775-29-8，纯度大于等于99.0%。4.131卡拉洛尔标准储备液：准确称取适量卡拉洛尔标准品（4.13），用乙睛配制成浓度为100μg/ml的4.14-标准储备液。此溶液在0℃～4℃避光保存。4.15空白样品提取液：用不含卡拉洛尔残留的样品，按照7.1、7.2制备空白样品提取液。4.16基质工作溶液：根据需要用空白样品提取液将标准储备液稀释成0.1ng/mL、0.2 ng/mL、0.5 ng/ml、1.0 ng/mL、2.0 ng/mL、5.0 ng/ml、10.0 ng/mL、100.0 ng/mL、200.0 ng/mL的标准工作溶液。置于1 SN/T 4144-—20150℃～4℃ 避光保存。4.17MCX固相萃取柱：60 mg/3ml，或相当者。使用前依次用3ml.甲醇、3mL水进行活化后备用。4.18凝胶色谱柱填料:Bio-Beads S-X3(38 μm～75 μm)。4.190.45μm微孔滤膜：有机系。5仪器和设备5.1高效液相色谱-质谱/质谱仪，配电喷雾离子源（ESI）。5.2凝胶净化色谱仪。5.3电子天平：感量为0.01g和0.1mg。5.4组织捣碎机。5.5涡旋混匀器。5.6氮吹仪。5.7均质器：最高转速不低于10000r/min。5.8离心机：最高转速不低于6000 r/min。5.9具塞塑料离心管:50 mL。6试样的制备与保存6.1肌肉（猪肉）、内脏（包括肝脏、肾脏）、脂肪和水产品（鱼肉、虾肉）：取代表性样约500 g，用组织捣碎机捣碎，装洁净容器作为试样，密封并做好标识，于一18℃下保存。6.2奶、蜂蜜、鸡蛋：取代表性样品约500.g，搅拌均匀后装人洁净容器内密封并做好标识，于4℃下保存。7 测定步骤7.1提取7.1.1肌肉（猪肉）、内脏（肝脏、肾脏）、鱼肉、虾肉称取5g试样（精确至0.01g）于50ml具塞离心管中，加人15mL甲醇，于涡旋混匀器上混合提取2min，用均质器（10000r/min)均质2min，5500 r/min离心3min，将有机相转移至50mL容量瓶中，残渣再用15mL甲醇均质提取-次。离心合并有机相，用水定容至50mL，待净化。7.1.2奶、蜂蜜、鸡蛋准确称取5g试样（精确至0.01 g）于50 mL具塞离心管中，加人15 ml.甲醇，涡旋提取2min，5500r/min离心3min,将有机相转移至50mL容量瓶中，残渣再用15ml，甲醇涡旋提取一次。离心合并有机相，用水定