SCT 7201.5-2006鱼类细菌病检疫技术规程 第5部分：白皮假单胞菌白皮病诊断方法.pdf

ICS 65.020.30B 41SC中华人民共和国水产行业标准SC/T7201.5—2006鱼类细菌病检疫技术规程第5部分：自皮假单胞菌自皮病诊断方法Rules for quarantining bacterial diseases of fishPart 5:Diagnostic method for white skin disease2006-12-06发布2007-02-01实施中华人民共和国农业部发布 SC/T 7201.5—2006前言SC/T7201《鱼类细菌病检疫技术规程》分为五个部分：-第1部分：通用技术；-第2部分：柱状嗜纤维菌烂鳃病诊断方法；-第3部分：嗜水气单胞菌及豚鼠气单胞菌肠炎病诊断方法；-第4部分：荧光假单胞菌赤皮病诊断方法；第5部分：白皮假单胞菌白皮病诊断方法。本部分为SC/T7201的第5部分。本部分的附录A为规范性附录。本部分由中华人民共和国农业部渔业局提出。本部分由全国水产标准化技术委员会归口。本部分起草单位：中国水产科学研究院长江水产研究所、中国水产科学研究院珠江水产研究所。本部分主要起草人：何力、邹为民、徐忠法、姜兰、周瑞琼、罗晓松。41 SC/T 7201.5-2006鱼类细菌病检疫技术规范第5部分：自皮假单胞菌自皮病诊断方法1 范围本部分规定了鱼类白皮假单胞菌白皮病(white skin disease)的诊断方法。本部分适用于鱼类白皮病的诊断。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB/T4789.28--1994食品卫生微生物检验染色体、培养基和试剂GB/T18652—2002致病性嗜水气单胞菌检验方法SC/T7014--2006水生动物检疫实验技术规范SC/T7201.1—2006鱼类细菌病检疫技术规范第1部分：通用技术SC/T7201.22006鱼类细菌病检疫技术规范第2部分：柱状嗜纤维菌烂鳃病诊断方法3病原体与流行情况3.1主要病原体白皮假单胞菌(Pseudomonas dermoalba）。3.2流行情况主要危害鲢、，草鱼和青鱼有时也可发生，特别是对鱼苗及夏花鱼种危害较大。全国各地都有发生。水温25℃以上为流行季节，当鱼体碰伤或体表被寄生虫损伤时，易发生。4试剂除非另有说明，在检验中仅使用确认为分析纯的试剂、蒸馏水或去离子水。常用试剂与染色液的配制应符合SC/T7021.12006中附录A的规定。微生物生化鉴定管可代替相应的试剂。4.1七叶灵。4.2醋酸铅。4.3氯化汞。4.4明胶。4.5脱脂奶粉。4.6可溶性淀粉。4.7柠檬酸铵铁。4.8几丁质。4.9酪氨酸。4.10过氧化氢。4.11：葡萄糖。 SC/T 7201.5--20064.12溴麝香草酚蓝。4.13乙醚。4.14碘液。4.15革兰氏染色液。4.16kovacs 试剂。4.17格里斯氏(Griess)试剂。4.18鞭毛染色剂。5培养基5.1胰陈琼脂培养基。5.2Christensen 氏枸橡酸培养基。5.3硝酸盐液体培养基。5.4休和利夫森二氏培养基。5.5明胶培养基(配制见附录A)5.1～5.4的培养基配制见SC/T7201.1—2006的附录B。6设备和器械按SC/T7201.1一2006第4章的规定执行。7采样遵照SC/T7014—2006第4章的规定。8病原菌的分离8.1平板划线分离用接种环取被检物在胰陈琼脂培养基平板上划线。可采用各种不同的常规划线方法，需尽量使其产生单个分散的菌落。在25℃恒温培养24h96h。8.2纯培养按SC/T7201.1--2006中7.3的规定执行。9 诊断9.1临床诊断9.1.1活动情况病鱼行动迟缓，病情严重时，头部向下，尾部向上，与水面垂直。9.1.2外部检查发病初期，尾柄处发白，以后迅速扩展蔓延，背鳍基部后面的体表全部发白。9.2实验室诊断9.2.1样品处理取少量病灶处黏液放在载玻片上，加上2滴～3滴无菌水，盖上盖玻片，在显微镜下观察：取病灶处黏液在胰陈琼脂培养基平板上划线分离、培养。9.2.2镜检在载玻片上滴一滴蒸馏水，取少许菌苔于水滴中，尽量分散，自然干燥。滴加鞭毛染色剂甲液染色44 SC/T 7201.5—200620min，用蒸馏水冲洗，晾干后，加乙液染30s～60s,加热，使其稍冒蒸汽而染液不干，冷却后用蒸馏水冲洗。在显微镜下观察。9.2.3生化检验9.2.3.1假单胞菌病原性检验9.2.3.1.1菌落观察在胰陈琼脂平板上25℃培养2d左右，观察培养基颜色变化。9.2.3.1.2鞭毛观察鞭毛染色按GB4789.28—1994中