SN_T 0751-2010进出口食品中嗜水气单细胞菌检验方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0751—2010代替SN/T0751—1999进出口食品中嗜水气单胞菌检验方法Determination of Aeromonas hydrophila in foods for import and export2010-05-27发布2010-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局敏码防动 SN/ 言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替SN/T0751-~1999《出口食品中嗜水气单细胞菌检验方法》。本标准与SN/T075.1一1999相比，主要技术变化如下：一标推要素进行了调整，增加了“规范性引用文件”、“术语和定义”和“要求”，删除了“抽样和制样”相关内容；检测方法的检测试验依据GB/T18652—2002《致病性嗜水气单胞菌检验方法》和《伯杰氏系统细菌学手册》（1994年第九版）作了修改。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海出人境检验检疫局。本标准主要起草人：王静、张琳、孙肖红、杨宇、胡孔新、张顺合、张乐。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T0751—1999。 SN/T0751—2010进出口食品中嗜水气单胞菌检验方法1范围本标准规定了进出口食品中水气单胞菌的检验方法。本标准适用于进出口水产品、水产加工品、罐头食品和小食品等食品中水气单胞菌的检验方法。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18652致病性嗜水气单胞菌检验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3. 1嗜水气单胞菌Aeromonashydrophila嗜水气单胞菌为细胞短杆状，两端圆形，至球菌状，直径1.0um~4.4μm；单个、成队或成链；以极生鞭毛运动，一一般单鞭毛；革兰氏阴性，氧化酶阳性。嗜水气单胞菌能导致鱼、鳖、牛蛙及蚌等水生动物的败血症及局部感染，人类也可因嗜水气单胞菌感染而发生腹泻、食物中毒、继发感染。3.2水产品seafood淡水或海水中的鱼类、甲壳类、软体动物类、藻类和其他的水生生物。3.3水产加工品fisheryproduct以水产品为主要原料加工制成的食品或其他产品。4检样要求4.1微生物检验用的样品保存时，应注意保持样品处于无污染的环境中，要低温保存，冻品保持冷冻状态，鲜活品应尽量保持样品的原状态（7℃～10℃），从抽样至送到实验室的时间不能超过48h。4.2在制样的操作过程中，应防止样品受到污染。5设备和材料5.1电子天平：感量0.1g。5.2均质器或乳钵。5.3生化培养箱：28℃±1℃，36℃±1℃。5.4低倍双目生物显微镜。 SN/T 0751—20105.5灭菌广口瓶：500ml。5.6灭菌三角烧瓶：250ml-.500mL。5.7灭菌吸管：1ml，10ml.。5.8灭菌平l:15mm,90mm。5.9灭菌小试管95mm×5cm。5.10接种环：直径3mm。6培养基和试剂6.1碱性蛋白陈水（APW）：见附录第-A-1章6.2氨苄青霖素麦康凯琼脂：见附录A第A.2章。6.3革兰氏染色液：见附录A第A.3章。6.4氧化酶试剂：见附录A第A.4章。6.5粘丝试验试剂：见附录A第A.5章，6.6嗜盐性试验试剂：见附录A第A.6章。6.7AHM鉴别培养基：见附录A第.？章。6.8Kovacs试剂：见附录A第A.8章、6.9GCF试管：见附录A第A.出南6.10赖氨酸脱羧酶肉汤：见附录A第A.10章。6.11氨酸脱羧酶培养基：见附录A第A.H156.12明胶培养基：见附录A第A.12章6.13糖发酵试验管：见附录A第.13章7检验步骤7. 1检测流程检测程序见附录B图B.17.2增菌7.2.1对液体食品，用无菌吸管取2ml.样品咖人装有925rL碱性蛋白豚水的500mL广口瓶中；迅速振摇，充分混匀。7.2.2对于固体食品，无菌操作取25g样品加入装有225ml.碱性蛋白陈水中，均质，28℃士1℃增菌培养，约在6h～8h有轻度混浊时，终止培养。7.3分离培养用接种环接取一环增菌培养液划线接种于氨苄青素麦康凯琼脂：于28℃士1℃培养18h～24h。嗜水气单胞菌在氨青霉索麦康凯琼脂培养基上典型菌落为边缘整齐、光滑、微凸、无色或淡黄色的圆形菌落。挑取3个～5个革兰氏染色为阴性短杆菌的菌落，接种营养琼脂平板进行纯化培养。7.4嗜水气单胞菌的初筛试验7.4.1氧化酶试验用接种环挑取琼脂平板上单个菌落少许，涂布于无菌滤纸片上，滴加氧化酶试剂，10s内观察细菌2 SN/T布处的颜色，出现红色即判定