SN_T 0669-2011出口肉及肉制品中庆大霉素残留检测方法 杯碟法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0669—2011代替 SN 0669-—1997出口肉及肉制品中庆大霉素残留检测方法杯碟法Determination of gentamycin residues in meats and meat products for export-Cylinder plate method2011-07-01实施2011-02-25 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 0669—2011前：言本标准按照GB/T 1.1一2009 给出的规则起草。本标准代替SN0669-1997《出口肉及肉制品中庆大霉素残留量检验方法杯碟法》。本标准与SN 0669一1997相比，主要技术变化如下：将原标准由定量检测方法变更为定性检测方法；将原标准名称《出口肉及肉制品中庆大霉素残留量检验方法杯碟法》修订为《出口肉及肉制品中庆大霉素残留检测方法杯碟法》；重新核实了原标准的检测低限，由0.1 mg/kg修订为 0.05mg/kg。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局、中国海洋大学。本标准主要起草人：刘云国、林洪、刘帅帅、贾俊涛、雷质文、林黎明、李正义、马维兴、唐静、张健、房保海、祝素珍、赵丽青、姜英辉、马云、韩青、李明哲、颜显辉。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-SN 0669—1997。I SN/T 0669-2011出口肉及肉制品中庆大霉素残留检测方法杯碟法范围1本标准规定了出口肉及肉制品中庆大霉素残留检测的杯碟方法，本标准适用于出口鸡肉中庆大霉素残留的筛选检测→阳性结果应用其他方法进行确认。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3试样制备与保存3.1.试样制备将代表性样品中的可食部分放人绞碎机中绞碎。充分混勾，用四分法缩分至不少于500g，作为试样。装入清洁容器内，加封后，标明标记。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。3. 2试样保存将试样于－18℃以下冷冻保存4原理用磷酸盐缓冲液(pH8.0±0.1)提取试样中的庆大霉素残留物，离心后取上清液作为样液，以表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis）作为指示菌，用杯碟法进行检测。5仪器和设备5.1培养血：内径 90mm、底部平整光滑的玻璃血或塑料血,配陶瓦盖,或玻璃盖内嵌入干燥的滤纸。5.2牛津杯:不锈钢圆筒,外径8.0mm±0.1mm,内径6.0mm±0.1 mm,高10.0mm士0.1 mm。5.3²克氏瓶:800mL。5.4²游标卡尺:测量范围0mm～200 mm,精度0.02 mm。5.5均质器：转速不低于8000r/min。5.6离心机：转速不低于4000 r/min。5.7恒温水浴锅：0℃～100℃,精度±1℃。5.8恒温培养箱：36℃士1℃，搁板应保持水平。 SN/T 0669--20115.9高压灭菌锅。5.10半对数坐标纸。5.11旋转蒸发器。5. 122可调移动器:10 μL～100 μL,100 μL～1 000 μL。6 试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，试验用水为蒸馏水、去离子水，试验用水应符合GB/T 6682的规定。6.1 试验菌种表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis）,菌号 CMCC 12228。6.2 培养基6.2.1增菌用液体培养及见A.1。6.2.2保存及传代用液体培养及见A.2。6.2.3检定用液体培养及见A.3。6.3硫酸庆大霉素标准品已知纯度标准品，密封避光，防潮，4℃保存。6.4磷酸盐缓冲液(pH8.0±0.1)称取13.3g磷酸二氢钾及6.2g氢氧化钾,溶解于1000mL水中，于121℃灭菌15min。6.5 庆大霉素标准储备液准确称取适量的硫酸庆大霉素标准品，用磷酸盐缓冲液配制成浓度为1000 μg/mL的标准储备液。保存于4℃冰箱中，可使用1个月。6.6庆大霉素标准工作液取一定量庆大霉素标准储备液，用磷酸盐缓冲液稀释成浓度为 0.05 μg/mL的庆大霉素标准工作液,应当日配制。6.7 生理盐水称取8.5g氯化钠，溶解于1000mL水中，分装后，于121℃灭菌15min。７ 检测方法7.1样液制备称取10g试样，置于均质杯中，加人10mL磷酸盐缓冲液8000r/min均质3min后，室温放置60 min，移人离心管中 4000 r/min离心15 min,取上清液于作为待测样液。7.2菌悬液制备将试验菌种接种于装有培养基I的试管中，于36℃土1℃培养24